Цитокины и сахарный диабет 1-го типа у человека (обзор с включением собственных данных)

В настоящее время установлено, что сахарный диабет (СД) 1-го типа (СД1Т) является хроническим аутоиммунным заболеванием, при котором происходит селективная органоспецифическая деструкция инсулинпродуцирующих бета-клеток островков Лангерганса (ОЛ) поджелудочной железы, не влияющая существенно на другие виды клеток ОЛ (альфа, дельта и РР) (Eisenbarth G.S., 1986; Atkinson M.A., Eisenbarth G.S., 2001; Зак К.П. и соавт., 2002; Jasinski J.M., Eisenbarth G.S., 2005). В результате посте­пенного разрушения или снижения функциональной активности около 80–90% бета-клеток наступает инсулиновая недостаточность, приводящая к нарушению гомеостаза глюкозы и появлению клинических симптомов, характерных для СД1Т. Вместе с тем существует и другая, довольно редкая и мало изученная неиммунная форма СД1Т, которая практически не встречается в Европе. Первый, аутоиммунный субтип СД1Т обозначается буквой А (СД1ТА), а второй — идиопатический — буквой Б (СД1ТБ) (De­vendra D. et al., 2004). Этот обзор по­священ аутоиммунному типу СД человека (СД1ТА).

За последние годы показано, что в патогенезе СД1ТА ведущую роль играют различные виды цитокинов. Под цитокинами понимают растворимые низкомолекулярные белковые или полипептидные гормоноподобные иммуномодуляторы, синтезируемые и секретируемые клетками иммунной системы: лимфоцитами (лимфокины), макрофагами/моноцитами (монокины), а также эндотелиальными клетками костного мозга, фибробластами, адипоцитами и другими видами клеток. Цитокины являются основными межклеточными медиаторами иммунной системы, а также участвуют во многих физиологических и патологических реакциях организма. Их условно разделяют на два субкласса: собственно цитокины и хемокины, имеющие свойства хемоаттрактантов (Atkin­son M.A., Wilson S.B., 2002; Rabinovitch A., 2003).

Обычные цитокины действуют преимущественно локально (апокринно, паракринно) на клетку, конъю­гированную с клеткой-продуцентом, или на соседние клетки. Ряд цитокинов (интерлейкин (ИЛ)-1, ИЛ-6, фактор некроза опухоли (ФНО)-α, эритропоэтин) могут оказывать влияние и дистантно, т.е. как обычные гормоны (Возианов А.Ф. и соавт., 1998; Rabinovitch A., 2003).

На сегодняшний день описано более 50 биологически активных цитокинов: большая группа интерлейкинов (19 видов), интерфероны, гемопоэтические колониестимулирующие ростовые факторы, цитокины, стимулирующие или тормозящие рост злокаче­ственных новообразований и др.

В зависимости от клетки-продуцента цитокины делят на: Th1-цитокины, секретируемые преимуще-ственно Th1-лимфоцитами, — субпопуляцией CD4⁺-клеток (ИЛ-2, ИЛ-12, ИЛ-18, интерферон (ИФН)-γ и ФНО-α); Th2-цитокины, секретируемые другой субпопуляцией CD4⁺-клеток, — Th2-лимфоцитами (ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-10 и ИЛ-13); моноцитарно-макрофагальные цитокины (ИЛ-1, ИЛ-6 и ФНО-α). Однако у человека, в отличие от грызунов, секреция того или иного вида цитокинов не ограничена определенным типом клеток (Th1 или Th2). В связи с этим предложена классификация цитокинов по их функции, т.е. на цитокины 1-го типа (ИЛ-2, ИЛ-12, ИФН-γ, ФНО-α), которые участвуют в регуляции клеточного иммунитета, и цитокины 2-го типа (ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-10 и ИЛ-13), стимулирующие преимущественно гуморальный иммунитет и ослабляющие клеточный. Вместе с тем следует отметить, что для цитокинов характерно то, что одна и та же клетка может секретировать несколько разных цитокинов и в то же время один и тот же цитокин может продуцироваться разными видами клеток. По биологическому действию цитокины условно разделяют также на провоспалительные (ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-1β, ИЛ-12, ИФН-γ, ФНО-α, гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фак­тор/ГМ-КСФ) и антивоспалительные (ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-13), а также факторы, регулирующие образование, пролиферацию и дифференцировку кроветворных и иммунных клеток (стволовоклеточный фактор/СКФ, ГМ-КСФ, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор/Г-КСФ, макрофагальный колониестимулирующий фактор/М-КСФ, эритропоэтин) (Возианов А.Ф. и соавт., 1998; Ra­bi­no­vitch A., 2003).

К хемокинам относят большой субкласс цитокинов, имеющих свойства хемоаттрактантов, которые осуществляют миграцию различных видов лейкоцитов, имеющих к ним рецепторы, в очаги воспаления и аутоиммунного процесса. К ним, в частности, относят: моноцитарный хемоаттрактантный протеин-1 (monocyte chemoattractant protein-1/МСР-1), макрофагальный воспалительный протеин-1α (macrophage inflammatory protein/MIP-1α), макрофагальный воспалительный протеин-1β (MIP-1β), регулятор активности экспрессии и секреции Т-клеток (Regulated on Activation, Normal T-cell Expressed and Secreted/RANTES), ИФН-продуцируемый протеин-10 (interferon-gamma-inducible protein/IP-10), лиганды хемокиновых рецепторов СС (СС-хемокины) и СХС (СХС-хемокины), МСР-3, МСР-5, а также ИЛ-8, ИЛ-16 и др. Хемокины образуются широким спектром клеток, являются продуктами бактерий и вирусов, агентами, возникающими при деструкции клеток. Кроме миграции различных видов лейкоцитов и фибробластов они участвуют также в процессе ангио­генеза, развития лимфоцитов, оказывают защитное действие от инфекций (Atkinson M.A., Wilson S.B., 2002; Попова В.В. и соавт., 2004б). Участие хемокинов в патогенезе СД1Т требует специального рассмотрения.

Большинство работ по изучению роли собственно цитокинов в патогенезе СД1Т проведено на экспериментальных животных со спонтанным аутоиммунным диабетом (NOD(nonobese diabetic)-мыши, BB(BioBreeding)-крысы) и, в значительно меньшей степени, на изолированных бета-клетках человека in vitro (Kukreja A., Maclaren N.K., 1999; Зак К.П. и соавт., 2002; Mandrup-Poulsen T., 2003a, b; Rabinovitch A., 2003). Однако, несмотря на определенные успехи, достигнутые в изучении роли цитокинов при экспериментальном диабете, многие вопросы их участия в возникновении и течении СД1Т у человека остаются нерешенными. Это обусловлено тем, что при использовании даже наиболее близких к человеку моделей аутоиммунного диабета у животных они не могут полностью отразить характер этого заболевания у человека в связи с уникальной видовой специфичностью его иммунной и генетической систем, различной продолжительностью жизни, присущими только человеку вирусными и инфекционными заболеваниями, особенностями доклинического и клинического течения болезни, а также наличием социальных и этических факторов. Это подтверждается также тем, что применение ряда терапевтических воздействий, которые оказывают высокий лечебный эффект у животных с СД1Т, у больного человека оказалось мало результативным (Roep B.O., Atkinson M., 2004; Aly T. et al., 2005; Arner P., 2005). В то же время изучение наиболее характерного прямого локального воздей­ствия цитокинов на ОЛ у человека затруднено в связи с проблемами, связанными с недоступностью поджелудочной железы для исследования в динамике. Изъятие же материала на аутопсии сопряжено с риском получения артефактов. Использование в этих целях специальных штаммов культуры клеток ОЛ также не является идеальным, поскольку такие клетки изолированы от клеток окружающих тканей поджелудочной железы, с которыми они находятся в постоянном взаимодействии, а также регулируются многими гуморальными соединениями, постоянно рециркулирующими в живом организме.

До последнего времени мы не располагали достоверными методами выявления начала аутоиммунного процесса в ОЛ поджелудочной железы в клинически асимптомной латентной стадии развития СД1Т у человека, продожающейся от нескольких месяцев до нескольких лет. Этот вопрос изучался только на моделях лабораторных животных. Революционным моментом в прижизненном, нетравматическом выявлении аутоиммунного процесса в ОЛ еще практически здорового человека явилось открытие аутоантител к ОЛ — декарбоксилазе глутаминовой кислоты (glutamic acid decarboxylase antibodies/GADA), протеину тирозинфосфатазы-2 (islet antigen 2 antibodies/IA-2A) и инсулину (insulin autoantibodies/IAA). Благодаря этому и стало возможным более глубокое изучение функции иммунной системы, в том числе и цитокинов в латентную фазу развития СД1Т у человека (Mueller P.W. et al., 2002; Попова В.В. и соавт., 2003б).

Самыми безопасными и доступными прижизненными методами получения информации о состоянии цитокиновой системы у человека являются определения: 1) содержания различных типов маркированных мононуклеаров, выделенных из периферической крови (ПК), содержащих те или иные типы цитокинов; 2) продукции цитокинов различными субпопуляциями мононуклеаров из ПК после их стимуляции митогенами или антигенами in vitro; 3) уровня циркулирующих цитокинов в ПК. Естественно, наиболее точное представление о состоянии цитокиновой системы у больного человека может быть получено при одновременном исследовании всех трех параметров.

Литература об уровне и продукции различных видов цитокинов у человека, больного СД1Т на разных этапах развития заболевания, очень ограничена и в некоторой мере неоднозначна. Рассмотрим имею­щуюся информацию, в том числе и полученную авторами, о состоянии наиболее изученных цитокинов при классическом СД1ТА более подробно.

ИЛ-1. Полипептид, молекулярная масса 17,3–17,5 кД. Его относят к макрофагальным цитокинам. Существуют три члена семейства ИЛ-1: ИЛ-1α, ИЛ-1β и специфический рецептор-антагонист ИЛ-1 (IL-1 receptor antagonist/IL-1Ra). ИЛ-1Ra является антивоспалительным цитокином, который ингибирует пути связывания ИЛ-1α и ИЛ-1β. Существуют еще два рецептора: ИЛ-1RI и ИЛ-1RII. ИЛ-1 продуцируется преимущественно активированными макрофагами, но его могут вырабатывать и другие типы клеток — лимфоциты, в том числе большие гранулосодержащие лимфоциты (БГЛ), клетки тимического эпителия, а также ряд клеток, не имеющих прямого отношения к иммунокомпетентным. ИЛ-1 обладает широким спектром иммунологической и неиммунологической активности. Но прежде всего это провоспалительный и гипертермический цитокин. ИЛ-1 синергически усиливает синтез ИЛ-2, ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-7, ИЛ-10 и ИЛ-12 (Dinarello C.A., 1996; Mandrup-Poulsen T., 1996; Возианов А.Ф. и соавт., 1998).

Согласно многочисленным экспериментальным исследованиям ИЛ-1β рассматривается как ключевой медиатор, вызывающий торможение секреции инсулина и стимуляцию экспрессии гена, кодирующего индуцибельную синтетазу оксида азота — NOS₂, которая приводит к образованию NO и смерти бета-клеток путем некроза и апоптоза у мышей и крыс со спонтанным аутоиммунным диабетом. Механизм этого явления очень сложен и в настоящее время изучается на молекулярном уровне. Кратко: триггерами сигнальных путей воздействия ИЛ-1β на бета-клетки грызунов являются митоген-активированная протеинкиназа (mitogen-activated protein kinase/МАРК) и ядерный фактор каппа В (nuclear factor-kappaB/NFκB) при участии в этом процессе супрессора цитокиновой сигнализации-3 (SOCS-3) (Frobose H. et al., 2005; Larsen L. et al., 2005; Storling I. et al., 2005a, b).

Однако у человека проявление цитотоксичности ИЛ-1 на ОЛ происходит только при совместном его действии с ИФН-γ и/или ФНО-α. Считают, что в отличие от грызунов смерть бета-клеток у человека наступает преимущественно от апоптоза (Larsen L. et al., 2005). Имеются также работы, проведенные на изолированных ОЛ поджелудочной железы человека, в которых показано, что блокадой NO-продукции не удается предотвратить гибель бета-клеток при их инкубации с ИЛ-1 (Rabinovitch A., 2003; Storling I. et al., 2005а, b).

Исследованию уровня ИЛ-1 в ПК и его продукции мононуклеарами у человека в доклиническую и клиническую стадии развития СД1Т посвящены единичные работы.

M.J. Hussain и соавторами (1996) при определении содержания ИЛ-1α у детей с недавно диагностированным СД1Т было выявлено значительное повышение его уровня в ПК. Более высокое содержание ИЛ-1α отмечалось также в предиабетический период у однояйцевых твинов. Кроме того, у детей с диабетом и их сибсов отмечали выраженное снижение продукции ИЛ-1α мононуклеарами ПК после их стимуляции митогенами in vitro. При СД1Т с длительным течением и при СД2Т подобных изменений не наблюдалось. Повышенный уровень ИЛ-1α, ИЛ-1β и особенно ИЛ-1Rа в сыворотке крови больных СД1Т был отмечен и другими авторами (Mooradian A.D. et al., 1991; Krusinova E. et al., 2004).

Наши исследования по изучению ИЛ-1 при СД1Т были проведены на 4 группах детей: 1) здоровые дети с нормогликемией без отягощенной наследственно­сти относительно СД1Т; 2) здоровые дети с нормогликемией и отягощенной наследственностью (родственники первой линии, которые больны СД1Т) и отрицательной реакцией к диабетассоциированным аутоантителам (ДААт), т.е. к декарбоксилазе глутаминовой кислоты (GADA), тирозинфосфатазе-2 (IA-2A) и инсулину (IAA); 3) здоровые дети с нормогликемией и отягощенной наследственностью и положительной реакцией не менее чем к двум ДААт, особенно к GADA и IA-2A; 4) больные дети с впервые выявленным СД1Т, но которым еще не проводилась терапия инсулином.

Было установлено, что наиболее частое повышение уровня циркулирующего ИЛ-1α наблюдается у ДААт-положительных детей с отягощенной наследст­венностью: медиана содержания ИЛ-1 у которых составляла 9,25 пг/мл против 4,9 пг/мл в норме. У детей, больных СД1Т, также отмечалось некоторое повышение ИЛ-1α в ПК, но не такое выраженное (медиана — 5,73 пг/мл).

Таким образом, полученные нами результаты, как и данные M.J. Hussain и соавторов (1996), наводят на мысль, что поступление ИЛ-1α в циркуляторное русло повышенное, особенно значительно в доклиническую стадию развития СД1Т, т.е. когда происходит активный иммунный процесс в ОЛ. При прекращении функционирования большинства бета-клеток и возникновении клинической стадии заболевания уровень ИЛ-1α может снижаться.

Имеются также работы (Maedler K. et al., 2004), в которых показано, что при культивировании ОЛ, взятых от здорового человека с очень низкими физиологическими дозами ИЛ-1β, происходит повышение продукции рецептора ИЛ-1Rа, пролиферация и улучшение функции бета-клеток, что наводит авторов на мысль о регулирующем действии ИЛ-1 на функцию бета-клеток. Высокие же дозы ИЛ-1 оказывали, наоборот, угнетающее действие. В то же время сообщается, что при инфицировании бета-клеток энтеровирусами, особенно вирусом Коксаки in vitro, происходит индукция ИЛ-1β (Olsson A. et al., 2005).

ИЛ-2. Наиболее изученный аутокринный и пара-кринный модулятор многочисленных биологических реакций, который играет главную роль в регуляции гуморального и клеточного иммунитета. У человека молекулярная масса ИЛ-2 составляет примерно 15 кД. ИЛ-2 продуцируется в основном стимулированными Th1-лимфоцитами и ЕК-клетками. Его действие на имунную систему плейотропно и осуществляется с помощью рецептора ИЛ-2 (interleukin-2 receptor/IL-2R), который состоит из трех протеиновых цепей: низкоактивного рецептора 55кД (СD25), промежуточного, включающего протеин 75 кД (СD122), и протеина 64 кД. Комбинация рецепторов низкой и промежуточной аффинности образует рецептор высокой аффинности. Повышение уровня ИЛ-2 в организме человека нередко приводит к цепной реакции, индуцирует повышение содержания других цитокинов (ИЛ-3, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-12, ФНО-α и др.) (Возианов А.Ф. и соавт., 1998).

По данным M.J. Hussain и соавторов (1996, 1998) у больных с недавно диагностированным СД1Т отмечается более высокий уровень циркулирующего ИЛ-2 в ПК по сравнению с длительно текущим СД1Т и здоровыми детьми. Другие авторы (Rapo­port M.J. et al., 1998; 2005; Aharoni D. et al., 1999; Citarrella R. et al., 2004) при предиабете и у недавно заболевших СД1Т находили как повышение уровня ИЛ-2 в ПК, так и значительное усиление его продукции мононуклеарами ПК после их стимуляции различными митогенами. Причем повышение уровня ИЛ-2 у ДААт-положительных лиц первой степени родства с больными СД1Т ассоциировано с прогрессированием заболевания (Rapoport M.J. et al., 2005). Особенно усиленная продукция ИЛ-2 мононуклеарами ПК описана после стимуляции активированных HLA-DR+ Т-лимфоцитов ПК у пациентов, у которых диагноз СД1Т был установлен за 6 недель до начала заболевания (Leech N.J. et al., 1999a, b), а также у детей с нормогликемией из группы риска с отягощенной наследственностью (HLA-DRB1*04 и HLA-DQB1*302), особенно ДААт- положительных (Duri­no­vic-Bello I. et al., 2002).

В то же время имеются также работы, в которых сообщается об обратном, т.е. о снижении продукции уровня ИЛ-2 в ПК и его продукции активированными мононуклеарами у больного СД1Т (Tomoda T. et al., 1994; Marchase R.B. et al., 1999; Herold K.C. et al., 2003).

Противоречивы данные и относительно циркулирующего рецептора к ИЛ-2 (CD25). Одни авторы сообщают о повышении уровня CD25 в ПК у больных СД1Т, в том числе в преклиническую стадию его развития (Hussain M.J. et al., 1998; Mianowska B. et al., 1999), в то время как другие — о снижении (Gi­or­dano C. et al., 1993). Имеются также работы, указывающие на то, что повышение уровня ИЛ-2R в ПК характерно только для больных СД1Т с пролиферативной ретинопатией (Doganay S. et al., 2002).

ИЛ-4. Относится к плейотропным антивоспалительным цитокинам 2-го типа. Он продуцируется преимущественно активированными Th2-лимфоцитами, а также тучными клетками (базофилами). На различных гемопоэтических и негемопоэтических клетках выявлен высокоаффинный рецептор к ИЛ-4 (CD 124). ИЛ-4 обладает выраженным действием на рост и дифференцировку многих видов иммунокомпетентных клеток (B, T, ЕK, ЕK-T, тучных клеток и др.), принимает участие в регуляции ангиогенеза. Он также способен ослаблять клеточный иммунитет (эффекторную функцию Th1-клеток) и стимулировать гуморальный иммунитет (Возианов А.Ф. и соавт., 1998; Rabinovitch A., 2003).

Многими исследователями (Kukreja A., Mac­laren N.K., 1999; Mi Q.S. et al., 2004; Chang Y. et al., 2005) показано, что ИЛ-4 оказывает защитное действие при аутоиммунной деструкции бета-клеток у грызунов с СД1Т, хотя имеются данные, что при ряде условий такое действие может отсутствовать (Serre­ze D.V. et al., 2005).

Информации о роли ИЛ-4 при СД1Т у человека еще очень мало, она находится на стадии накопления материала и, естественно, ограничена существующими методическими возможностями исследования этого вопроса у больного. По данным M.J. Hussain и соавторов (1996, 1998) у детей с начальной стадией СД1Т и сибсов больных с нормогликемией не было выявлено достоверных изменений содержания ИЛ-4 как циркулирующего, так и после стимуляции мононуклеаров in vitro фитогеммагглютинином (ФГА). Отсутствие заметных изменений уровня ИЛ-4 в ПК и продукции его стимулированными мононуклеарами у больных с начальной стадией СД1Т и при предиабете сообщается и другими авторами (Aharoni D. et al., 1999; Leech N.J. et al., 1999a, b).

Однако большинство авторов находили более низкий уровень ИЛ-4 в ПК и его продукцию мононуклеарами и Т-клетками после их стимуляции митогенами у больных детей с начальной стадией СД1Т, а также у ДААт-положительных, сибсов и твинов с нормогликемией по сравнению с ДААт-отрицательными и здоровыми детьми (Berman M.A. et al., 1996; Rapoport M.J. et al., 1998; Kallmann B.A. et al., 1999; Karlsson M.G. et al., 1999; Halminen M. et al., 2001; Kukreja A. et al., 2002; Schmid S. et al., 2002). По данным M.J. Rapoport и соавторов (2005) содержание и продукция ИЛ-4 мононуклеарами ПК у детей первой линии родства с больными СД1Т может быть даже повышена, но со временем при развитии заболевания уровень ИЛ-4 в ПК значительно снижается.

Проведенные нами исследования согласуются с работами той группы авторов, которые считают, что у большинства детей с впервые выявленным СД1Т и у ДААт-положительных детей с нормогликемией содержание ИЛ-4 в сыворотке ПК снижено. У таких детей ИЛ-4 совсем не выявлялся, в то время как у здоровых детей медиана его содержания в ПК равнялась 0,25 мг/мл (Попова В.В. и соавт., 2003а, б; 2004а, б, в).

При обследовании ДААт-положительных детей по программе DAISY (Diabetes Autoimmunity Study in the Young) был обнаружен значительный полиморфизм области INS-гена, не принадлежащий к HLA-региону, который регулирует продукцию ИЛ-4 и ИЛ-4R, что также говорит в пользу защитной роли этого цитокина в развитии СД1Т (Steck A.K. et al., 2005).

Все вышеизложенное дает право присоединиться к мнению, что ИЛ-4 играет защитную роль при развитии СД1Т у человека. Одним из подтверждений такого мнения является также то, что при преинкубации ИЛ-4 с островковыми клетками поджелудочной железы человека полностью предотвращается апо­птоз, вызываемый «коктейлем», состоящим из ИЛ-1 + ФНО-α + ИФН-γ (Santangelo C. et al., 2001).

ИЛ-6. Плейотропный, провоспалительный цитокин, принадлежащий к центральным регуляторам иммунитета и кроветворения. Гликопротеин с молекулярной массой 26 кД у человека. На клетках-мишенях к нему имеется рецептор — ИЛ-6R (СD126). Синтезируется преимущественно моноцитами/макрофагами, Th2-лимфоцитами, адипоцитами, клетками мышц, а также другими видами клеток. Имеет широкий спектр биологического действия, которое осуществляется как локально (паракринно/аутокринно), так и дистантно, подобно обычным гормонам. Резкое повышение циркулирующего ИЛ-6 отмечено при инфекциях, травмах, других видах стресса, а также при ожирении, инсулиновой резистентности и СД2Т. Он считается маркером системного воспаления. ИЛ-6 стимулирует секрецию гормона роста и тормозит секрецию тиреоидстимулирующего гормона, специфически усиливает липолиз и окисление жирных кислот, играет важную роль в гомеостазе глюкозы, повышая ее продукцию печенью, регулирует ее потребление мышцами. Подкожное применение ИЛ-6 у человека приводит к дозозависимой индукции уровня глюкозы в ПК без изменения содержания инсулина и С-пептида. ИЛ-6 участвует в регуляции острофазной реакции (Возианов А.Ф. и соавт., 1998; Lagathu C. et al., 2002; Rabinovitch A., 2003; Gustafson B., Smith U., 2004; Hamid Y.H. et al., 2005).

На сегодняшний день есть много литературы, посвященной изучению ИЛ-6 при СД2Т и метаболическом синдроме. Это объясняется тем, что в последние годы доказано, что жировая ткань является эндокринным органом, секретирующим ряд важных цитокинов (адипонектин, лептин, ФНО-α), а также ИЛ-6, которые регулируют жировой обмен и, как предполагают, участвуют в развитии метаболического синдрома и инсулиновой резистентности (Fasshauer M., Paschke R., 2003; Watt M.J. et al., 2005).

Информация о роли ИЛ-6 в этиопатогенезе СД1Т у человека весьма ограничена и отчасти неоднозначна. До последнего времени, основываясь на экспериментальных данных, считалось, что ИЛ-6 является антидиабетическим цитокином, однако недавние данные, полученные при исследовании больных СД1Т, привели к пересмотру такого мнения (Зак К.П. и соавт., 2002). Так, при исследовании уровня циркулирующего ИЛ-6 и его продукции мононуклеарами ПК у детей с впервые выявленным СД1Т не было обнаружено существенного изменения содержания и образования ИЛ-6 (Zhang T.M. et al., 1999) или даже наблюдалось его значительное повышение (Erbag­ci A.B. et al., 2001; Basu S. et al., 2005).

Особенно высокий уровень циркулирующего ИЛ-6 отмечен у больных СД1Т с кардиоваскулярными осложнениями, ретинопатией и нефропатией (Saraheimo M. et al., 2003; 2005; Yokota C. et al., 2003; Sfakianaki M. et al., 2005; Schram M.T. et al., 2005). Повышенное содержание ИЛ-6 при диабетической нефропатии связывают с неспецифическим генерализованным воспалением и повышением образования этого цитокина в мезенхимальных глобулярных клетках почки, а также полиморфизмом гена ИЛ-6 (Nakano K. et al., 2003). Значительное повышение уровня ИЛ-6 у пациентов с диабетической нефропатией может даже иметь прогностическое значение и служить тестом, указывающим на необходимость проведения гемодиализа (Martin S. et al., 2003). Повышенный уровень ИЛ-6 в плазме ПК и стекловидном теле описан при диабетической ретинопатии (Doganay S. et al., 2002). При обследовании по программе EURODIAB 348 больных СД1Т в возрасте <36 лет с микроваскулярными и кардиоваскулярными осложнениями было отмечено достоверное повышение содержания ИЛ-6 в ПК как при непролиферативной, так и при пролиферативной формах ретинопатии (Schram M.T. et al., 2005).

В наших исследованиях (Зак К.П. и соавт., 2002; Попова В.В. и соавт., 2003б; 2004а, б) было обнаружено более частое выявление повышенного уровня циркулирующего ИЛ-6 у пациентов, находящихся на ранней клинической и доклинической стадиях развития СД1Т (у ДААт-положительных детей, родственники первой линии которых больны СД1Т), по сравнению со здоровыми нормогликемическими детьми без отягощенной наследственности.

На основании анализа приведенных выше данных следует прийти к заключению, что у большинства больных СД1Т, особенно с осложнениями, отмечается усиление образования и повышение уровня циркулирующего ИЛ-6 в ПК, что, возможно, является отражением системного воспаления, часто сопровождающего СД1Т (Schram M.T. et al., 2005).

ИЛ-10. Человеческий ИЛ-10 — типичный антивоспалительный цитокин 2-го типа. Его молекулярная масса ≈19 кДа. Он имеет широкий спектр биологического действия, является важным регулятором функций лимфоидных и миелоидных клеток. ИЛ-10 стимулирует рост стволовых кроветворных клеток, тучных клеток и тимоцитов, костимулирует β-клеточную дифференциацию и секрецию Ig, усиливает цитотоксичность Т-клеток, регулирует ангиогенез. Он способен блокировать синтез цитокинов, продуцируе­мых макрофагами, т.е. таких провоспалительных цитокинов, как ИФН-γ и ФНО-α. У человека главным источником образования ИЛ-10 являются СD4+-клетки (как Th1, так и Th2), макрофаги, тимоциты, В-лимфоциты, тучные клетки и кератиноциты (Возианов А.Ф. и соавт., 1998; Rabinovitch A., 2003).

На основании экспериментальных исследований большинство авторов склонны относить ИЛ-10 к цитокинам, оказывающим защитное действие при развитии СД1Т (Rabinovitch A., 2003; Bonato V. et al., 2005; Chang Y. et al., 2005). В то же время есть работы, в которых на основании исследования ЕK-Т-клеток у NOD-мышей, не было обнаружено противодиабетического действия ИЛ-10, в отличие от ИЛ-4 (Mi Q.S. et al., 2004).

При исследовании уровня циркулирующего ИЛ-10 в сыворотке крови больных детей с впервые выявленным СД1Т по одним данным (Hussain M.J. et al., 1996) не отмечается изменения его уровня в ПК по сравнению со здоровыми детьми того же возраста. По другим данным (Mysliwska J. et al., 2005) циркулирующий ИЛ-10 выявлялся в ПК у 3 из 30 здоровых детей, а у больных СД1Т — у 11 из 30.

При определении секреции ИЛ-10 мононуклеарами ПК у больных с впервые выявленным СД1Т установлено значительное снижение его продукции (Rapoроrt M.J. et al., 1998; Leech N.J. et al., 1999a, b; Marchase R.B. et al., 1999). Было также установлено, что секреция ИЛ-10 мононуклеарами ПК у больных СД1Т после введения адреналина резко снижена по сравнению со здоровыми детьми (Geissler A. et al., 1999). При исследовании секреции ИЛ-10 мононуклеарами ПК, стимулированными тепловым шоковым протеином (heat shock protein/hsp60), на парах монозиготных дискордантных близнецов было установлено, что реакция ИЛ-10 на стимуляцию hsp60 была более сильной у IСА (islet cell antibodies)-положительных, чем у IСА-отрицательных близнецов (Szebeni A. et al., 2005).

В проведенных нами исследованиях (Попова В.В. и соавт., 2004 а, б) не было обнаружено достоверных изменений циркулирующего ИЛ-10 в ПК у ДААт-по­ложительных детей и больных СД1Т ввиду значительных индивидуальных колебаний.

Обобщая данные литературы и результаты соб­ственных исследований, можно прийти к заключению, что при предиабете и СД1Т у детей более часто наблюдается снижение секреции ИЛ-10 мононуклеарами ПК. Изменение уровня циркулирующего ИЛ-10 менее закономерно, что, по-видимому, обусловлено влиянием на него ряда других факторов.

ИЛ-12. Провоспалительный цитокин 1-го типа, являющийся ключевым модулятором иммунных функций. Уникальность ИЛ-12, отличающая его от других видов цитокинов, в том, что он гетеродимер, состоящий из двух единиц 40 и 35 кДа с общей молекулярной массой 75 кДа. Главная его особенность — активация естественных клеток-киллеров (ЕКК) и усиление пролиферации, дифференцировки и развития Т-лимфоцитов (особенно Th1 и ЕК-Т-клеток). ИЛ-12 — мощный индуктор образования ИФН-γ ЕКК и Т-лимфоцитами. Он обладает также свойствами, препятствующими ангиогенезу. Образуется в организме человека преимущественно моноцитами/макрофагами и ЕКК (Возианов А.Ф. и соавт., 1998; Rabinovitch A., 2003). Показано, что локус IDDM 18, ассоциированный у человека с СД1Т, идентифицируется у человека вблизи гена, кодирующего р40 субъединицу ИЛ-12 (Adorini L. et al., 2001). Имеются единичные работы о значительном повышении уровня ИЛ-12 в ПК, а также продукции его моноцитами у больных СД1Т, особенно осложненного ретинопатией (Winkler G. et al., 1998; Ng W.Y. et al., 1999; Giulietti A. et al., 2004).

ИЛ-13. Многофункциональный антивоспалительный цитокин 2-го типа, играющий ключевую роль в регуляции иммунных реакций. Ген ИЛ-13 локализован на хромосоме 5q31 вблизи гена ИЛ-4. Кроме того, существует еще ген ИЛ-4Rα, находящийся на хромосоме 16р11.2-12.1. Оба гена участвуют в регуляции биологического действия как ИЛ-13, так и ИЛ-4. У человека ИЛ-13 продуцируется СD4+ Т-лимфоцитами и другими видами клеток (Rabinovitch A., 2003; Steck A.K. et al., 2005).

Значение ИЛ-13 при СД1Т у человека еще мало изучено. У больных СД1Т описано снижение продукции этого цитокина мононуклеарами ПК (в покое и после стимуляции митогенами) по сравнению с контрольной группой и больными с аутоиммунным тиреоидитом (Citarrella R. et al., 2004). Сообщается также о снижении образования ИЛ-13 у больных СД1Т после стимуляции тепловым шоковым протеином hsp60.

При обследовании по программе DAISY у ДААт-положительных детей с отягощенной наследственностью, у которых впоследствии развился СД1Т, было выявлено значительное нарушение гена, кодирующего ИЛ-13, что дало повод A.K. Steck и соавторам (2005) высказать предположение о защитном действии этого цитокина при СД1Т.

ИЛ-15. Провоспалительный цитокин 1-го типа, молекулярная масса 14–15 кД, по своим биологическим свойствам подобен ИЛ-2. При действии на клетки-мишени использует рецептор ИЛ-2R, благодаря чему стимулирует пролиферацию цитотоксических Т-лимфоцитов и цитолитическую активность ЕКК, усиливает образование ИФН-γ и ФНО-α, оказывает выраженное антинеопластическое действие, которое, по-видимому, обусловлено его стимуляцией ЕКК и моноцитов. Продуцируется преимущественно стромальными элементами костного мозга (Возианов А.Ф. и соавт., 1998).

Информация о роли ИЛ-15 при СД1Т у человека весьма ограничена. Существуют работы, в которых показано, что ИЛ-15 играет важную роль в активации и накоплении мононуклеаров, приводит к образованию инсулитов в поджелудочной железе в ранней стадии развития СД1Т у человека (Cardozo A.K. et al., 2003). Имеются также данные о значительном повышении концентрации ИЛ-15 в сыворотке крови больных СД1Т по сравнению со здоровыми людьми (Kuczynski S. et al., 2005).

ИЛ-18. Провоспалительный цитокин 1-го типа, тесно связанный с семейством ИЛ-1 (известен также как ИЛ-1γ или ИФН-γ-индуцирующий фактор). Играет большую роль в синтезе ИФН-γ Т-клетками и ЕКК, предположительно посредством стимуляции ИЛ-12. ИЛ-18 индуцирует также миграцию микроваскулярных эндотелиальных клеток. Продуцируется преимущественно макрофагами (Dinarello C.A., 1999; Nicoletti F. et al., 2001).

Существуют только единичные работы, касающие­ся изучения роли ИЛ-18 при СД1Т у человека. Так, при определении уровня ИЛ-18 в сыворотке крови «здоровых» ДААт-положительных людей с отягощенной наследственностью относительно СД1Т, было обнаружено его повышение, в отличие от ДААт-отрицательных пациентов и контроля (Nicoletti F. et al., 2001). Повышенная концентрация ИЛ-18 и ее ассоциации с GADA и IA-2A в сыворотке ПК наблюдается также у больных с начальной стадией СД1Т (Hanifi-Moghaddam P. et al., 2003). Диабетогенное свойство ИЛ-18 недавно было подтверждено и в опытах на животных (Zaccone P. et al., 2005).

ИФН. Интерфероны относятся к плейотропным провоспалительным цитокинам 1-го типа, характеризующимся антивирусным, антипролиферативным и антинеопластическими свойствами. Имея широкий спектр биологического действия, они принадлежат к одним из наиболее важных иммунорегуляторов иммунной системы, являясь модуляторами реактивности человека. Под воздействием вирусов, антигенов и митогенов они секретируются почти всеми видами клеток, но все же 90% ИФН продуцируется клетками крови и костного мозга. Семейство ИФН включает в себя три класса: ИФН-α (тип I, лейкоцитарный, антивирусный), ИФНβ (тип I фибробластный, или лимфотоксин) и ИФН-γ (тип II, или эндотоксин) (Возианов А.Ф. и соавт., 1998; Rabinovitch A., 2003).

В эксперименте на животных и изолированных ОЛ человека и грызунов in vitro было показано, что ИФН-γ обладает выраженным локальным цитотоксическим действием на инсулинпродуцирующие клетки, особенно, как уже указывалось, при со­вместном его применении с ИЛ-1 и/или ФНО-α (Chen M. et al., 2005; Bruun C. et al., 2005; Storling I. et al., 2005a, b).

При исследовании циркулирующего ИФН-γ и его продукции мононуклеарами ПК при предиабете и СД1Т человека были получены неоднозначные результаты. По данным одних авторов (Tovo P.A. et al., 1984; Hussain M.J. et al., 1996; 1998; Rapoport M.J. et al., 1998; Karlsson M.G. et al., 1999; 2000; Durinovic-Bello I. et al., 2002; Nicoletti F. et al., 2002; Karlsson Faresjo M.G. et al., 2004) у детей и юношей с впервые выявленным СД1Т отмечается значительное повышение содержания ИФН-γ в сыворотке ПК и его спонтанная гиперпродукция мононуклеарами, особенно после стимуляции митогенами. Очень высокая спонтанная секреция ИФН-γ мононуклеарами была обнаружена у детей с нормогликемией первой линии родства с больными СД, входящими в группу высокого риска, по сравнению со здоровыми детьми и даже больными СД1Т.

Другие исследователи (Aharoni D. et al., 1999; Beyan H. et al., 2005) не находили существенных изменений уровня ИФН-γ в ПК у больных СД1Т по сравнению с нормой, а также разницы в содержании и продукции ИФН-γ между ДААт-положительными и ДААт-отрицательными монозиготными близнецами и сибсами больных СД1Т (Kallmann B.A. et al., 1999; Schmid S. et al., 2002).

Нами также не было выявлено статистически достоверных изменений содержания ИФН-γ в ПК ДААт-позитивных детей с отягощенной наследственностью относительно СД1Т и больных с впервые выявленным СД1Т по сравнению с ДААт-негативными и здоровыми нормогликемическими детьми (Попова В.В. и соавт., 2003а, б; 2000а, б, в).

Некоторые авторы (Kukreja A. et al., 2002) даже сообщают о сниженном уровне продукции ИФН-γ мононуклеарами ПК (особенно СD3⁺-клетками) после их стимуляции митогенами у больных с впервые выявленным СД1Т и ДААт-положительных пациентов. При проточно-цитометрическом определении интрацеллюлярного содержания ИФН-γ в СD4⁺– и СD8⁺-лимфоцитах ПК у больных СД1Т было обнаружено значительное уменьшение количества клеток, содержащих ИФН-γ по сравнению с контролем и лицами из группы риска. Этот феномен авторы объяс­няют двояко: как уходом CD4⁺-и CD8⁺– популяций лимфоцитов в очаг воспаления, так и тем, что сниженное образования ИФН-γ в организме делает бета-клетки более чувствительными к вирусным инфекциям, приводя их к деструкции (Avanzini M.A. et al., 2005).

ИФН-α также оказывает цитотоксическое действие на бета-клетки, но более слабое, чем ИФН-γ. В то же время ИФН-α менее токсичен, поэтому широко используется в медицинской практике для лечения вирусных и онкологических заболеваний (Возианов А.Ф. и соавт., 1998). В то же время некоторыми авторами (Devendra D., Eisenbarth G.S., 2004) высказывается гипотеза, что ИФН-α может играть существенную роль в патогенезе СД1Т у детей, так как установлено значительное повышение уровня ИФН-α в ПК при энтеровирусных заболеваниях и, следовательно, возможность его непосредственного действия на ОЛ. Известны также случаи возникновения СД при длительной терапии ИФН-γ в больших дозах. В то же время блокирование ИФН-α предупреждает развитие у них диабета.

ФНО. Фактор некроза опухоли является типичным воспалительным цитокином, считается одним из маркеров неспецифического генерализованного воспаления. Существует два вида ФНО: ФНО-α (кахектин) и ФНО-β (лимфотоксин). Оба вида ФНО относятся к макрофагальным цитокинам, так как продуцируются преимущественно макрофагами в ответ на воздействия различных видов вирусов, бактерий, паразитов, митогенов, а также других видов иммунных медиаторов. ФНО-α человека имеет молекулярную массу ≈17,4 кДа и два рецептора: RI и RII. Для ФНО характерен широкий спектр биологического действия. Он является неотъемлемой частью стресса, участвует в развитии многих заболеваний, оказывает цитотоксическое действие на клетки некоторых опухолей, посредством RI (tumour necrosis factor receptor superfamily, member 1A/TNFRSF1A) может влиять на метаболизм глюкозы (Возианов А.Ф. и соавт., 1998; Rabinovitch A., 2003).

На сегодняшний день есть много данных, касающихся исследования действия ФНО-α на изолированные ОЛ in vitro, а также на бета-клетки грызунов и трансгенных мышей. In vivo показано, что ФНО-α является одним из главных цитокинов, индуцирующих апоптоз инсулинпродуцирующих клеток, особенно при одновременном его применении с ИЛ-1 и ФНО-α (Kukreja A., Maclaren N.K., 1999; Зак К.П. и соавт., 2002; Mandrup-Poulsen T., 2003a, b; Bruun C. et al., 2005). Известны также данные о деструктивном действии ФНО-α на ОЛ, выделенные из поджелудочной железы человека, in vitro (Chen M. et al., 2005). Вместе с тем в работе B. Movahedi и соавторов (2004) показано, что в суспензии изолированных ОЛ, полученной из ткани поджелудочной железы человека, находится большое количество клеток панкреатических протоков, тесно соединенных с бета-клетками, которые способны секретировать большое количество ФНО-α и, следовательно, участвовать в апоптозе.

Изучению уровня циркулирующего ФНО-α и его продукции мононуклеарами ПК человека in vivo, т.е. у больных СД1Т, посвящено относительно небольшое количество работ. Так, по данным M.J. Hussain и соавторов (1996, 1998), у многих больных с впервые выявленным СД1Т и их сибсов с нормогликемией наблюдается значимое, иногда довольно существенное, повышение уровня циркулирующего ФНО-α. Повышенное содержание ФНО-α отмечалось также у однояйцевых твинов, у которых в последствии возник СД1Т, в отличии от близнецов, у которых это заболевание не развилось.

Повышение содержания ФНО-α в ПК и его продукции мононуклеарами после стимуляции митогенами описано и другими авторами (Kulseng B. et al., 1996; Zhang T.M. et al., 1999; Erbagci A.B. et al., 2001; Herold K.C. et al., 2003, Skowronski M. et al., 2004). При этом было обнаружено, что более выраженное повышение секреции ФНО-α и поступление его в циркуляторное русло наблюдается при начальной стадии СД1Т, чем при длительном течении заболевания. Однако при длительном заболевании уровень ФНО-α может снова резко повышаться при образовании ретинопатии (Doganay S. et al., 2002; Ben-Mahmud B.M. et al., 2004).

Согласно нашим данным (Попова В.В. и соавт., 2003а, б; 2004а, б, в) повышенное содержание ФНО-α в ПК наблюдается у многих детей с впервые выявленным СД1Т и у ДААт-положительных детей с нормогликемией и отягощенной наследственностью. Медиана содержания ФНО-α у ДААт-положительных детей значительно превышала таковую как в контроле, так и у ДААт-отрицательных детей и уже заболевших лиц. Полученные нами результаты согласуются с мнением, что подъем уровня ФНО-α в циркуляции характерен для ранней стадии деструкции бета-клеток и выявляется еще задолго до развития клинически диагностированного СД1Т, отражая, по-видимому, пик аутоиммунного процесса, происходящего в поджелудочной железе. По мере разрушения бета-клеток и стихания аутоиммунного процесса содержание ФНО-α в ПК может даже снижаться. Однако в по­следующем возникновении воспалительных и сосудистых осложнений (ангиопатии, нефропатии, ретинопатии) может снова происходить повышение ФНО-α, иногда довольно значительное, что часто указывает на плохой прогноз (Martin S. et al., 2003; Torn C. et al., 2003; Klementova M. et al., 2004; Skowronski M. et al., 2004; Schram M.T. et al., 2005).

Имеются также отдельные сообщения (Martin S. et al., 2003; Torn C. et al., 2003; Klementova M. et al., 2004), в которых показано, что при СД1Т изменяется уровень циркулирующих растворимых рецепторов ФНО-α RI и RII.

Таким образом, обобщая данные литературы и результаты собственных исследований, можно прийти к заключению, что продукция различных видов цитокинов и их поступление в циркуляторное русло имеет значительные индивидуальные колебания как у здоровых лиц, так и у больных СД1Т. В то же время для больных СД1Т и особенно лиц, находящихся в доклинический стадии заболевания, характерно повышение продукции и содержания ряда цитокинов в ПК, преимущественно 1-го типа (ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-12, ФНО-α), которые оказывают тормозящее действие на продукцию инсулина бета-клетками, приводя их к апоптозу. Интересно отметить, что наиболее четкие изменения при СД1Т наблюдаются со стороны содержания циркулирующих макрофагальных цитокинов: ИЛ-1, ИЛ-6 и ФНО-α, которые обладают не только локальным, но и дистантным действием, характерным для традиционных гормонов, и потому их удается легче выявить в ПК ввиду их по­стоянной рециркуляции. В то же время в организме существует ряд антивоспалительных цитокинов 2-го типа (ИЛ-4, ИЛ-13), которые способны оказывать противоположный эффект, т.е. — защитное противодиабетическое действие. Приведенные данные не исключают того, что в патогенезе СД1Т у человека могут принимать участие другие виды цитокинов, особенно оказывающие локальное действие на уровне клеток-мишеней, которое выявить прижизненно у человека, по известным причинам, пока еще трудно. Сложность проблемы заключается еще и в том, что изменение уровня одного из цитокинов сопровождается рядом изменений содержания других видов цитокинов. Имеющаяся информация безусловно указывает на то, что различные виды цитокинов играют регулирующую роль в патогенезе СД1Т: с одной стороны, приводят к функциональному угнетению и гибели бета-клеток, а с другой — наоборот, защищают их от этого воздействия. Они могут действовать как непосредственно на ОЛ, так и опосредованно регулируя содержание, функции и миграцию различных иммунорегуляторных клеток, участвующих в образовании инсулитов и секреции цитотоксических соединений, а также в поддержании гомеостаза иммунной системы всего организма. Дальнейшее изучение роли и механизма участия цитокинов в патогенезе СД1Т у человека открывает новые возможности эффективных целенаправленных методов раннего предупреждения и лечения этого заболевания.

ЛИТЕРАТУРА

• Возианов А.Ф., Бутенко А.К., Зак К.П. (1998) Цитокины. Биологические и противоопухолевые свойства. Наукова думка, Київ, 315 с.
• Зак К.П., Малиновская Т.Н., Тронько Н.Д. (2002) Иммунитет у детей, больных сахарным диабетом. Книга плюс, Киев, 111 с.
• Попова В.В., Маньковский Б.Н., Зак К.П. (2003а) Прогнозирование сахарного диабета 1 типа. Doctor, 5: 13–15.
• Попова В.В., Мельниченко С.В., Зак К.П. и др. (2004в) О значительном снижении уровня хемокина ИЛ-16 в крови детей с впервые выявленным сахарным диабетом 1 типа. Лік. справа. Врачеб. дело, 7: 32–34.
• Попова В.В., Мельниченко С.В., Лукашова Р.Г. и др. (2003б) Содержание различных цитокинов в крови здоровых детей-сибсов, позитивных и негативных по наличию диабетассоциированных аутоантител (GADA, IA-2A, IAA). Лік. справа. Врачеб. дело, 8: 26–29.
• Попова В.В., Мельниченко С.В., Лукашова Р.Г. и др. (2004а) Уровень цитокинов в крови детей с впервые выявленным сахарным диабетом 1 типа. Доповіді Національної академії наук України, 5: 190–193.
• Попова В.В., Мельниченко С.В., Малиновская Т.Н. и др. (2004б) Содержание цитокинов в крови в доклиническую и раннюю клиническую стадии развития сахарного диабета у детей. Проблеми ендокринної патології, 2: 53–59.
• Adorini L. (2001) Interleukin 12 and autoimmune diabetes. Nat. Genet, 27(2): 131–132.
• Aharoni D., Mor A., Bistrizer T. et al. (1999) Aberrant Th1/Th2 cytokine secretory pattern in pre-IDDM high risk individuals. In: Abstr. Book 4th Immunol. Diabet. Soc. Congr., November 12–15, 1999, Rome, p. 119.
• Aly T., Devendra D., Eisenbarth G.S. (2005) Immunotherapeutic approaches to prevent, ameliorate, and cure type 1 diabetes. Am. J. Ther., 12(6): 481–490.
• Arner P. (2005) Resistin: yet another adipokine tells us that men are not mice. Diabetologia, 48(11): 2203–2205.
• Atkinson M.A., Eisenbarth G.S. (2001) Type 1 diabetes: new perspective on disease pathogenesis and treatment. Lancet, 358(9283): 221–229.
• Atkinson M.A., Wilson S.B. (2002) Fatal attraction: chemokines and type 1 diabetes. J. Clin. Invest., 110(11): 1611–1613 (http://www.jci.org/cgi/content/full/110/11/1611).
• Avanzini M.A., Ciardelli L., Lenta E. et al. (2005) IFN-gamma low production capacity in type 1 diabetes mellitus patients at onset of disease. Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes, 113(6): 313–317.
• Basu S., Larsson A., Vessby J. et al. (2005) Type 1 diabetes is associated with increased cyclooxygenase- and cytokine-mediated inflammation. Diabetes Care, 28(6): 1371–1375 (http://care.diabetesjournals.org/cgi/content/full/28/6/1371).
• Ben-Mahmud B.M., Mann G.E., Datti A. et al. (2004) Tumor necrosis factor-alpha in diabetic plasma increases the activity of core 2 GlcNAc-T and adherence of human leukocytes to retinal endothelial cells: significance of core 2 GlcNAc-T in diabetic retinopathy. Diabetes, 53(11): 2968–2976.
• Berman M.A., Sandborg C.I., Wang Z. (1996) Decreased IL-4 production in new onset type 1 insulin-dependent diabetes mellitus. J. Immunol., 157(10): 4690–4696.
• Beyan H., Humphreys R.E., Leslie R.D.G. (2005) Study of T cell response to Ii-Key/MHC class II epitope hybrid peptides in human type 1 diabetes. Diabetologia, 48(Suppl. 1): A99.
• Bonato V., Dionisi S., Vendrame F. et al. (2005) Oral probiotic administration in the NOD mouse induces systemic and islet IL-10 production and down regulates pancreatic expression of proinflammatory cytokine and chemokines. Diabetologia, 48(Suppl. 1): А193.
• Bruun C., Heding P.E., Ronn S.G. et al. (2005) Inhibitory effects of suppressor of cytokine signalling-3 on tumor necrosis factor-alpha induced signalling in pancreatic beta cells. Diabetologia, 48(Suppl. 1): А181.
• Cardozo A.K., Proost P., Gysemans C. et al. (2003) IL-1beta and IFN-gamma induce the expression of diverse chemokines and IL-15 in human and rat pancreatic islet cells, and in islets from pre-diabetic NOD mice. Diabetologia, 46(2): 255–266.
• Chang Y., Piao S.L., Gao S., Zheng D.M. (2005) Regulatory effects of micronutrient complex on the expression of Th1 and Th2 cytokines in diabetic C57BL mice. Wei Sheng Yan Jiu, 34(1): 64–66.
• Chen M., Yang Z.D., Zmith K.M. et al. (2005) Activation of 12-lipoxygenase in proinflammatory cytokine-mediated beta cell toxicity. Diabetologia, 48(3): 486–495.
• Citarrella R., Richiusa P., Mattina A. et al. (2004) Different TH1/TH2 cytokine expression in type 1 diabetes mellitus patients (T1DM) alone or associated with autoimmune thyroid disease (AITD). Diabetologia, 47(Suppl. 1): A188.
• Devendra D., Eisenbarth G.S. (2004) Interferon alpha — a potential link in the pathogenesis of viral-induced type 1 diabetes and autoimmunity. Clin. Immunol., 111(3): 225–233.
• Devendra D., Liu E., Eisenbarth G.S. (2004) Type 1 diabetes: recent development. BMJ, 328(7442): 750–754 (http://bmj.bmjjournals.com/cgi/content/full/328/7442/750).
• Dinarello C.A. (1996) Biologic basis for interleukin-1 in disease. Blood, 87(6): 2095–2147 (http://www.bloodjournal.org/cgi/reprint/87/6/2095).
• Dinarello C.A. (1999) Interleukin-18. Methods, 19(1): 121–132.
• Doganay S., Evereklioglu C., Er H. et al. (2002) Comparison of serum NO, TNF-alpha, IL-1beta, sIL-2R, IL-6 and IL-8 levels with grades of retinopathy in patients with diabetes mellitus. Eye, 16(2): 163–170.
• Durinovic-Bello I., Riedl M., Rosinger S. et al. (2002) Th2 dominance of T helper cell response to preproinsulin in individuals with preclinical type 1 diabetes. Ann. N. Y. Acad. Sci., 958: 209–213.
• Eisenbarth G.S. (1986) Type I diabetes mellitus. A chronic autoimmune disease. N. Engl. J. Med., 314(21): 1360–1368.
• Erbagci A.B., Tarakcioglu M., Coskun Y. et al. (2001) Mediators of inflammation in children with type I diabetes mellitus: cytokines in type I diabetic children. Clin. Biochem., 34(8): 645–650.
• Fasshauer M., Paschke R. (2003) Regulation of adipocytokines and insulin resistance. Diabetologia, 46(12): 1594–1603.
• Frobose H., Ronn S.G., Heding P.E. et al. (2005) Suppressor of cytokine signalling (SOCS)-3 inhibits the beta-cytotoxic IL-1 signalling by targeting the TRAF6/TAK1 complex. Diabetologia, 48(Suppl. 1): А37.
• Geissler A., Schneider M.L., Bochow B., Koop I. (1999). Regulation of IL-10 release from peripherial blood cells by epinephrine in disturbed in DM type 1. Diabetologia, 42 (Suppl. 1): А101.
• Giordano C., De Maria R., Todaro M. et al. (1993) Study of T-cell activation in type I diabetic patients and pre-type I diabetic subjects by cytometric analysis: antigen expression defect in vitro. J. Clin. Immunol., 13(1): 68–78.
• Giulietti A., Stoffels K., Decallonne B. et al. (2004) Monocytic expression behavior of cytokines in diabetic patients upon inflammatory stimulation. Ann. N. Y. Acad. Sci., 1037: 74–78.
• Gustafson B., Smith U. (2004) Interleukin (IL)-6, a paracrine regulator of the adipose tissue, impairs adipocyte differentiation. Diabetologia, 47(1): A460.
• Halminen M., Simell O., Knip M., Ilonen J. (2001) Cytokine expression in unstimulated PMBC of children with type 1 diabetes and subjects positive for diabetes-associated autoantibodies. Scand. J. Immunol., 53(5): 510–513.
• Hamid Y.H., Rose C.S., Urhammer S.A. et al. (2005) Variations of the interleukin-6 promoter are associated with features of the metabolic syndrome in Caucasian Danes. Diabetologia, 48(2): 251–260.
• Hanifi-Moghaddam P., Schloot N.C., Kappler S. et al. (2003) An association of autoantibody status and serum cytokine levels in type 1 diabetes. Diabetes 52(5): 1137–1142 (http://diabetes.diabetesjournals.org/cgi/content/full/52/5/1137).
• Herold K.C., Burton J.B., Francois F. et al. (2003) Activation of human T cells by FcR nonbinding anti-CD3 mAb, hOKT3gamma1(Ala-Ala). J. Clin. Invest., 111(3): 409–418.
• Hussain M.J., Maher J., Warnock T. et al. (1998) Cytokine overproduction in healthy first degree relatives of patients with IDDM. Diabetologia, 41(3): 343–349.
• Hussain M.J., Peakman M., Gallati H. et al. (1996) Elevated serum levels of macrophage-derived cytokines precede and accompany the onset of IDDM. Diabetologia, 39(1): 60–69.
• Jasinski J.M., Eisenbarth G.S. (2005) Insulin as primary autoantigen for type 1A diabetes. Clin. Dev. Immunol., 12(3): 181–186.
• Kallmann B.A., Lampeter E.F., Hanifi-Moghaddam P. et al. (1999) Cytokine secretion patterns in twins discordant for type 1 diabetes. Diabetologia, 42(9): 1080–1085.
• Karlsson Faresjo M.G., Ernerudh J., Ludvigsson J. (2004) Cytokine profile in children during the first 3 months after the diagnosis of type 1 diabetes. Scand. J. Immunol., 59(5): 517–526.
• Karlsson M.G., Lawesson S.S., Ludvigsson J. (2000) Th1-like dominance high risk first-degree relatives of type I diabetic patients. Diabetologia, 43(6): 742–749.
• Karlsson M.G., Sederholm S., Ludvigsson (1999) Th1-like dominance high risk first-degree relatives of type I diabetic patients. Diabetologia, 42(Suppl. 1): A63.
• Klementova M., Wohl P., Krusinova E. et al. (2004) Circadian variation in urinary excretion of TNFα-soluble receptor 1 and TNFα-soluble receptor 2 in type 1 diabetes mellitus. Diabetologia, 47(Suppl. 1): A461.
• Krusinova E., Wohl P., Fejfarova V. et al. (2004) Effect of acute hyperinsulinaemia on plasma concentrations of selected cytokine antagonists in type 1 diabetes mellitus. Diabetologia, 47(Suppl. 1): A461.
• Kuczynski S., Winiarska H., Abramczyk M. et al. (2005) IL-15 is elevated in serum patients with type 1 diabetes mellitus. Diabetes Res. Clin. Pract., 69(3): 231–236.
• Kukreja A., Cost G., Marker J. et al. (2002) Multiple immuno-regulatory defects in type-1 diabetes. J. Clin. Invest., 109(1): 131–140 (http://www.jci.org/cgi/content/full/109/1/131).
• Kukreja A., Maclaren N.K. (1999) Autoimmunity and diabetes. J. Clin. Endocrinol. Metab., 84(12): 4371–4378 (http://jcem.endojournals.org/cgi/content/full/84/12/4371).
• Kulseng B., Skjak-Braek G., Folling I., Espevik T. (1996) TNF production from peripheral blood mononuclear cells in diabetic patients after stimulation with alginate and lipopolysaccharide. Scand. J. Immunol., 43(3): 335–340.
• Lagathu C., Bastard J.P., Auclair M. et al. (2002) Interleukin-6 induces insulin resistance in 3T3-F442A adipocytes. Diabetologia, 45(2): A223.
• Larsen L., Storling J., Darville M. et al. (2005) Extracellular signal-regulated kinase is essential for interleukin-1-induced and nuclear factor kappaB-mediated gene expression in insulin-producing INS-1E cells. Diabetologia, 48(12): 2582–2590.
• Leech N.J., Elsegood K.A., Narendran P. et al. (1999a) T helper 1 profile of recently activated circulating T cells in type 1 diabetes. Diabetologia, 42(Suppl. 1): A316.
• Leech N.J., Elsegood K.A., Narendran P., Dayan C.M. (1999b) Deficit in Th2 cytokine production from peripheral T cell subsets in recent onset type 1 diabetes. In: Abstr. Book 4th Immunol. Diabet. Soc. Congr., November 12–15, 1999, Rome, p. 75.
• Maedler K., Schumann D.M., Bosco D. et al. (2004) Interleukin-1β is a physiological regulator of β-cell proliferation and secretory function. Diabetologia, 47(Suppl. 1): A158.
• Mandrup-Poulsen T. (1996) The role of interleukin-1 in the pathogenesis of IDDM. Diabetologia, 39(9): 1005–1029.
• Mandrup-Poulsen T. (2003a) Apoptotic signal transduction pathways in diabetes. Biochem. Pharmacol., 66(8): 1433–1440.
• Mandrup-Poulsen T. (2003b) Beta cell death and protection. Ann. N.Y. Acad. Sci., 1005: 32–42.
• Marchase R.B., Chen P.Y., Su Z. et al. (1999) Lymphocytes from subjects with type 1 diabetes are deficient in capacitative calcium entry: implications to immune function, cytokine production, and T cell subset representation. Abstr. Book 4th Immunol. Diabet. Soc. Congr., November 12–15, 1999, Rome, p. 82.
• Martin S., Fueth R., Forster S. et al. (2003) Prediction of mortality in haemodialysis patients by gene expression analysis on mRNA level. Diabetologia, 46(Suppl. 2): A334.
• Mi Q.S., Ly D., Zucker P. et al. (2004) Interleukin-4 but not interleukin-10 protects against spontaneous and recurrent type 1 diabetes by activated CD1d-restricted invariant natural killer T-cells. Diabetes, 53(5): 1303–1310.
• Mianowska B., Bodalska-Lipinska J., Krokowski M. et al. (1999) Soluble interleukin-2 receptor in prediabetes, in overt diabetes type 1 and diabetes type 2. Diabetologia, 41(Suppl. 1): A84.
• Mooradian A.D., Reed R.L., Meredith K.E., Scuderi P. (1991) Serum levels of tumor necrosis factor and IL-1 alpha and IL-1 beta in diabetic patients. Diabetes Care, 14(1): 63–65.
• Movahedi B., Van de Casteele M., Caluwe N. et al. (2004) Human pancreatic duct cells can produce tumour necrosis factor-alpha that damages neighbouring beta cells and activates dendritic cells. Diabetologia, 47(6): 998–1008.
• Mueller P.W., Bingley P.J., Bonifacio E. et al. (2002) Predic­ting type 1 diabetes using autoantibodies: the latest results from the diabetes autoantibody standardization program. Diabetes Technol. Ther., 4(3): 379–400.
• Mysliwska J., Zorena K., Semetkowska-Jurkiewicz E. et al. (2005) High levels of circulating interleukin-10 in diabetic nephropathy patients. Eur. Cytokine Netw., 16(2): 117–122.
• Nakano K., Obayashi H., Fukui M. et al. (2003) Interleukin-6 polymorphism (-634C/G) in the promoter region and the progression of diabetic nephropathy in the type 2 diabetes. Diabetologia, 46(Suppl. 2): A333.
• Ng W.Y., Thai A.C., Lui K.F. et al. (1999) Systemic levels of cytokines and GAD-specific autoantibodies isotypes in Chinese IDDM patients. Diabetes Res. Clin. Pract., 43(2): 127–135.
• Nicoletti F., Conget I., Di Marco R. et al. (2001) Serum levels of the interferon-gamma-inducing cytokine interleukin-18 are increased in individuals at high risk of developing type I diabetes. Diabetologia, 44(3): 309–311.
• Nicoletti F., Conget I., Di Marco R. et al. (2002) Serum concentrations of the interferon-gamma-inducible chemokine IP-10/CXCL10 are augmented in both newly diagnosed Type I diabetes mellitus patients and subjects at risk of developing the disease. Diabetologia, 45(8): 1107–1110.
• Olsson A., Johansson U., Korsgren O., Frisk G. (2005) Inflammatory gene expression in Coxsackievirus B-4-infected human islets of Langerhans. Biochem. Biophys. Res. Commun., 330(2): 571–576.
• Rabinovitch A. (2003) Immunoregulation by cytokines in autoimmune diabetes. Adv. Exp. Med. Biol., 520: 159–193.
• Rapoport M.J., Bistritzer T., Aharoni D. et al. (2005) Th/Th2 cytokine secretion of first degree relatives of T1DM patients. Cytokine, 30(5): 219–227.
• Rapoport M.J., Mor A., Vardi P. et al. (1998) Decreased secretion of Th2 cytokines precedes Up-regulated and delayed secretion of Th1 cytokines in activated peripheral blood mononuclear cells from patients with insulin-dependent diabetes mellitus. J. Autoimmun., 11(6): 635–642.
• Roep B.O., Atkinson M. (2004) Animal models have little to teach us about type 1 diabetes: 1. In support of this proposal. Diabetologia, 47(10): 1650–1656.
• Santangelo C., Marchetti P., Marselli L. et al. (2001) Suppressors of cytokine signaling (SOCS) in cytokine-induced human islet cell damage. Diabetologia, 44(Suppl. 1): A41.
• Saraheimo M., Forsblom C., Hansen T.K. et al.; on behalf of the FinnDiane Study Group (2005) Increased levels of mannan-binding lectin in type 1 diabetic patients with incipient and overt nephropathy. Diabetologia, 48(1): 198–202.
• Saraheimo M., Teppo A.M., Forsblom C. et al. (2003) Diabetic nephropathy is associated with low-grade inflammation in type 1 diabetic patients in the FinnDiane Study. Endocrinology, 46(Suppl. 4): A330.
• Schmid S., Molteni A., Fuchtenbusch M. et al. (2002) Reduced IL-4 associated antibody responses to vaccine in early pre-diabetes. Diabetologia, 45(5): 677–685.
• Schram M.T., Chaturvedi N., Schalkwijk C.G. et al. (2005) Markers of inflammation are cross-sectionally associated with microvascular complications and cardiovascular disease in type 1 diabetes — the EURODIAB Prospective Complications Study. Diabetologia, 48(2): 370–378.
• Serreze D.V., Wasserfall C., Ottendorfer E.W. et al. (2005) Diabetes acceleration or prevention by a coxsackievirus B4 infection: critical requirements for both interleukin-4 and gammа interferon. J. Virol., 79(2): 1045–1052.
• Sfakianaki M., Xydakis D., Papadogiannakis A., Ki­­ri­laki E. (2005) Low-grade inflammation is correlated to diabetic nephropathy in type 2 diabetes mellitus. Diabetologia, 48(Suppl. 1): A375.
• Skowronski M., Zozulinska D., Juszczyk J., Wierusz-Wy­socka B. (2004) Assessment of inflammatory markers in patients with diabetes mellitus and chronic hepatitis C virus infection. Diabetologia, 47(Suppl. 1): A296.
• Steck A.K., Bugawan T.L., Valdes A.M. et al. (2005) Association of non-HLA genes with type 1 diabetes autoimmunity. Diabetes, 54(8): 2482–2486 (http://diabetes.diabetesjournals.org/cgi/content/full/54/8/2482).
• Storling I., Binzer J., Andersson A.K. et al. (2005a) Nitric oxide contributes to cytokine-induced apoptosis in pancreatic beta cells via potentiation of JNK activity and inhibition of Akt. Diabetologia, 48(10): 2039–2050.
• Storling I., Binzer J., Andersson A.K. et al. (2005b) Nitric oxide causes activation of JNK suppression of Akt in insulin-secreting cells. Diabetologia, 48(Suppl. 1): A38.
• Szebeni A., Schloot N., Kecskemeti V. et al. (2005) Th1 and Th2 cell responses of type 1 diabetes patients and healthy controls to human heat-shock protein 60 peptides AA437-460 and AA394-408. Inflamm. Res., 54(10): 415–419.
• Tomoda T., Kurashige T., Taniguchi T. (1994) Imbalance of the interleukin 2 system in children with IDDM. Diabetologia, 37(5): 476–482.
• Torn C., Hillman M., Sanjeevi C.B., Landin-Olsson M. (2003) TNF-α RII in relation to type 1 diabetes and latent autoimmune diabetes in adults. Diabetologia, 46(Suppl. 2): A108.
• Tovo P.A., Cerutti F., Palomba E. et al. (1984) Evidence of circulating interferon-gamma in newly diagnosed diabetic children. Acta Paediatr.Scand. 73(6): 785–788.
• Watt M.J., Carey A.L., Wolsk-Petersen E. et al. (2005) Hormone-sensitive lipase is reduced in the adipose tissue of patients with type 2 diabetes mellitus: influence of IL-6 infusion. Diabetologia, 48(1): 105–112.
• Winkler G., Dworak O., Salamon F. et al. (1998) Increased interleukin-12 plasma concentrations in both, insulin-dependent and non-insulin-dependent diabetes mellitus. Diabetologia, 41(4): 488.
• Yokota C., Kawai K., Okuda Y., Katayama S. (2003) Relationship of diabetic nephropathy to plasma levels of IL-6, PAI-1, total homocysteine and LP(a) levels in Japanese type 2 diabetics. Endocrinology, 46(Suppl. 2): A330.
• Zaccone P., Phillips J., Conget I. et al. (2005) IL-18 binding protein fusion construct delays the development of diabetes in adoptive transfer and cyclophosphamide-induced diabetes in NOD mouse. Clin. Immunol., 115(1): 74–79.
• Zhang T.M., Zhang Y., Han C.H., Jin S.X. (1999) Advanced glycation end product-induced TNF-α and IL-6 production by peripheral lymphocytes of diabetic patients. Diabetologia, 42(Suppl. 1): A10.