ВЛИЯНИЕ БРОНХО-МУНАЛА НА ИММУННЫЙ СТАТУС БОЛЬНЫХ С БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ В ДИНАМИКЕ ЛЕЧЕНИЯ

30 грудня 1999
10048
Резюме

Изучено влияние нового иммуномодулятора бактериального происхождения (БРОНХО-МУНАЛ) на показатели количественной и функциональной активности иммунокомпетентных клеток больных с инфекционнозависимой бронхиальной астмой (БА). Представлены также данные о наиболее эффективной дозе препарата. Доказано, что применение БРОНХО-МУНАЛА целесообразно в комплексном лечении и профилактике обострений БА

 

ВВЕДЕНИЕ

 

В последние годы основное внимание уделяется патогенетическому подходу к лечению больных с бронхиальной астмой (БА) (Вишнякова Л.А., 1990; Гаращенко Т.И., 1999; Федосеев Г.Б, 1999; Palma-Carlos A.G., Palma-Carlos M.L., 1990). В настоящее время экспериментально и клинически доказано, что БА — иммунозависимое заболевание, в патогенезе которого особое значение имеют нарушения как клеточного, так и гуморального звена иммунной системы, а также изменения местного иммунитета дыхательных путей (Emmerich B. et al., 1990; Clot J., 1994).

Учитывая, что при БА отмечают нарушение целого ряда показателей иммунитета, под воздействием инфекционного агента может произойти еще более глубокое угнетение иммунного ответа, обусловленное как экзо-, так и эндотоксинами, высвобождающимися вследствие бактериолиза. При этом иммуностимуляции, усиливающейся с увеличением количества возбудителей, противостоит ею же обусловленная иммуносупрессия. Наряду с опасностью рецидива повышается вероятность перехода заболевания из острой формы в хроническую. В связи с этим представляется весьма целесообразной иммуностимуляция бактериальными антигенами, лишенными иммуносупрессивного компонента. Традиционная терапия не позволяет элиминировать персистенцию бактериальных агентов. Это объясняет необходимость применения бактериальных вакцин.

Одним из препаратов, относящихся к подобным вакцинам, является БРОНХО-МУНАЛ («Lek Pharmaceutical and Chemical Company», Slovenia). Препарат содержит лиофилизированный лизат 8 бактерий, которые чаще всего являются возбудителями инфекций верхних дыхательных путей: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Klebsiella ozaenae, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Streptococcus viridans, Streptococcus piogenes, Branhamella catar-rhalis. Компоненты препарата индуцируют антигеноспецифический иммунный ответ, поликлональную стимуляцию В-клеток, а также активацию макрофагов. БРОНХО-МУНАЛ повышает активность NK-клеток, увеличивает выработку цитокинов, количество циркулирующих Т-лимфоцитов, повышает уровень IgA, IgG, IgM, а также содержание иммуноглобулинов в секрете дыхательных путей. Противопоказаний к применению препарата нет.

ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Цель нашего исследования — изучение иммунологической реактивности организма до и после применения БРОНХО-МУНАЛА курсом длительностью 10 и 30 дней в комплексной терапии пациентов с БА. Иммунологическое обследование проводили у 97 больных с инфекционнозависимой БА (ИЗБА), при лечении которых применяли БРОНХО-МУНАЛ, — 1-я (основная) группа, у 40 — с ИЗБА, при базисном лечении которых не использовали БРОНХО-МУНАЛ (2-я, группа сравнения), и у 20 практически здоровых лиц (3-я, контрольная группа).

Работ, посвященных изучению влияния БРОНХО-МУНАЛА на показатели системного и местного иммунитета у пациентов с ИЗБА, мы не обнаружили. Разноречивы также данные о наиболее эффективных дозах препарата, способах его введения и сроках проводимого лечения.

Для определения наиболее эффективной дозы БРОНХО-МУНАЛА сравнивали влияние препарата (в дозах 0,014; 0,14 и 1,4 мкг/мл) в реакции активного розеткообразования у пациентов 1-й и 3-й групп.

Доказано, что эффективность БРОНХО-МУНАЛА в дозе 0,14 мкг/мл соответствует таковой в стандартной дозе; минимальную дозу (0,014 мкг/мл) использовали для выявления высокой чувствительности иммунокомпетентных клеток к препарату; максимальную — для определения низкой чувствительности. Положительным считали эффект при различии показателей в 1-й и 3-й группах более 20%.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Данные об изменении экспрессии лимфоцитов после инкубации их при воздействии БРОНХО-МУНАЛА в различных дозах представлены в табл. 1.

Таблица 1

Влияние БРОНХО-МУНАЛА на лимфоциты у больных с ИЗБА
в реакции активного розеткообразования в зависимости от дозы

Еа-РОК

Доза, мкг/мл

% стимуляции/угнетения при дозе, мкг/мл

0,014

0,14

1,4

0,014

0,14

1,4

25,91±1,27

32±2,14*

38,91±
2,01*

33,8±
2,01*

37,62±
6,12

61,34±
6,81*

52,01±
9,01

* Различия между значениями Еа-РОК у лиц 1-й и 3-й групп достоверны (р<0,15).

 Наиболее выраженное действие отмечено при средней дозе препарата (соответствующей стандартной). Оценивали эффективность дозы с учетом исходного количества Еа-розеткообразующих клеток (Еа-РОК) в периферической крови больных. Для этого пациенты были распределены на группы в зависимости от содержания Еа-РОК: нормальное, умеренно сниженное и значительно сниженное (табл. 2). У лиц 3-й (контрольной) группы не было отмечено изменения количества Еа-РОК после инкубации с БРОНХО-МУНАЛОМ ни в одной дозе. Уровень активного розеткообразования под влиянием БРОНХО-МУНАЛА изменяется в зависимости от исходного количества Еа-РОК в крови.

Таблица 2

Влияние БРОНХО-МУНАЛА на уровень Еа-РОК у больных с ИЗБА в зависимости от исходного уровня иммунологической реактивности

Группа обследованных лиц

Количество

Исходное содержание Еа-РОК

Еа-РОК+БРОНХО-МУНАЛ

Контроль

Концентрации

1-я группа

% стабилиза-ции / угнетения

Больные с нормальным уровнем Еа-РОК (26±3,2%)

30

28,3±0,45

28,51±0,61

I

31,41±2,61

17,12±4,3

II

36,12±1,01*

26,37±2,41

III

32,81±1,9

16,1±5,61

Больные с умеренно сниженным уровнем Еа-РОК (14,8±5%)

60

19,4±0,41

18,71±0,7

I

26,71±1,28*

44,16±5,2

II

30,9±1,8*

65,32±7,35

III

27,62±1,52*

52,97±7,6

Больные с резко сниженным уровнем Еа-РОК (10,1±1,5%)

47

11,02±0,31

12,02±0,52

I

15,74±0,6*

37,15±5,13

II

19,25±0,77*

67,9±7,38

III

18,39±0,75

59,82±6,27

3-я (контрольная)

20

29,6±1,8

27,50±1,4

I

30,1±0,71

II

26,4±1,61

III

25,77±2

* Достоверность различий между показателями у лиц 1-й и 3-й групп (р<0,05).

Так, при содержании Еа-РОК в крови в пределах нормы препарат в средней дозе оказывал стимулирующее действие, а после инкубации лимфоцитов с минимальной и максимальной концентрацией БРОНХО-МУНАЛА достоверных изменений в реакции Еа-РОК не зарегистрировано.

У больных с умеренно и значительно сниженным относительным содержанием Еа-РОК в крови БРОНХО-МУНАЛ оказывал стимулирующее действие на уровне активного розеткообразования независимо от дозы. Необходимо отметить, что наиболее активно розеткообразование происходило под воздействием БРОНХО-МУНАЛА в средней дозе и не зависело от исходного состояния иммунологической активности.

Таким образом, БРОНХО-МУНАЛ оказывал иммуномодулирующий эффект на розеткообразующую способность Т-лимфоцитов у больных с ИЗБА: минимально выраженный — при уровне Еа-РОК в пределах нормы, стимулирующий — при исходно низком уровне. Эффект воздействия БРОНХО-МУНАЛА зависит от степени угнетения розеткообразующей способности Т-лимфоцитов и дозы препарата.

Мы провели исследования индивидуальной чувствительности Т-лимфоцитов к БРОНХО-МУНАЛУ (табл. 3). У 88,7% больных отмечена чувствительность при назначении препарата в среднетерапевтической дозе, у 7,2% — в минимальной, а у 2% — в максимальной дозе. Поэтому для лечения больных применяли БРОНХО-МУНАЛ в средней дозе.

Таблица 3

Стимулирующее влияние БРОНХО-МУНАЛА in vitro  в реакции Еа-РОК 

Стимулирующее влияние бронхо-мунала в дозе:

n=97

Абс. число

%

минимальной (I доза)

7

7,2

среднетерапевтической (II доза)

86

88,7

максимальной (III доза)

2

2

Отсутствие стимуляции независимо от дозы

2

2

Для оценки состояния иммунологической реактивности организма до и после лечения учитывали комплекс иммунологических показателей — содержание Е-РОК, Еа-РОК, ЕАС-РОК, РБТЛ на ЛМ, Кон-А в концентрации 20 и 40 мкг/мл для определения функциональной активности Т-хелперов I и II, субпопуляционный состав Т-клеток (CD3, CD4, CD8).

Исходное состояние иммунологической реактивности больных с ИЗБА было вполне сопоставимым. Сведения об иммунокорригирующих свойствах БРОНХО-МУНАЛА представлены в табл. 4–7. Результаты анализа изменений состояния клеточного иммунитета у больных свидетельствуют, что у пациентов изучаемых групп установлен достоверно более низкий уровень относительного числа T-клеток (CD3), а у лиц 3-й (контрольной) группы — тенденция к увеличению их числа (см. табл. 4).

 

Таблица 4

Содержание лимфоцитов у больных с ИЗБА в реакции Еа-РОК до и после иммунотропной терапии БРОНХО-МУНАЛОМ (M+m)

 

Еа-РОК (контроль)

Срок обследования

Доза, мг/мл

I — 0,7

II — 7

III — 70

25,81±1,2

а

32,02±1,17*

38,96±2,04*

33,83±2,01*

37,16±0,92

б

48,6±1,68*

40,11±1,12*

46,81±1,28*

Примечание:
а — до лечения; б — после лечения.
* Достоверность различий до и после лечения (р<0,05).

Таблица 5

Субпопуляционный состав Т-клеток у больных с ИЗБА  до и после лечения БРОНХО-МУНАЛОМ (M+m)

Группа обсле-дованных лиц

Коли-чество

Субпопуляционный состав
Т-лимфоцитов (%)

CD3

CD4

CD8

CD4/CD8

1-я (основная)
до лечения
после лечения

97

47,5±1,12*

26,73±0,8*

18,4±1,58

1,34±0,09*

97

56,7±1,9**

37,75±2,9*

21,15±2,5**

1,52±0,09**

2-я (сравнения)
до лечения
после лечения

40

47,5±1,2

26,73±0,8*

18,4±1,58*

1,54±0,09*

40

50,9±1,2

27,9±0,8

19,4±1,5

1,42±0,09

3-я (контрольная)

20

60,4±0,21

35,4±0,35

25,1±0,5

1,5±0,04

* Достоверность различий по сравнению с показателями у лиц 3-й группы (р<0,05).
** Достоверность с данными до лечения (р<0,005);
то же в табл. 6, 7.

 Таблица 6

Пролиферативная активность лимфоцитов периферической крови у больных с ИЗБА  до и после лечения БРОНХО-МУНАЛОМ (M+m)

Группа обследованных лиц

Количество

 

РБТЛ (индекс стимуляции)

 

ЛМ

 

Кон-А
(20 мкг/мл)

 

Кон-А
(40 мкг/мл)

1-я (основная)до лечения

97

15,9±1,2*

6,5±0,2*

3,2±0,1*

после лечения

97

25,1±1,2**

10,2±1,2*

5,1±0,2**

2-я (сравнения)до лечения

40

15,9±1,2*

6,5±0,2*

3,2±0,1*

после лечения

40

16,9±1,1

7,3±0,1

4,1±0,2

3-я (контрольная)

20

26,7±2,1

16,5±1,2

8,1±0,2

 

Таблица 7

Состояние В-звена иммунитета у больных с ИЗБА  до и после лечения БРОНХО-МУНАЛОМ (M+m)

Группа обсле-дованных лиц

Коли-чество

 

ЕАС-РОК (%)

 

IgG (г/л)

 

IgM (г/л)

 

IgA (г/л)

 

IgE общ. (Ке/л)

1-я (основная)до лечения

97

21,2±1,5*

13,8±0,6*

1,9±0,1*

2,8±0,1*

91,4±8,3*

после лечения

97

16,5±2**

13,4±0,5**

2,1±0,1**

2,8±0,1**

21,3±9,1**

2-я (сравнения)до лечения

40

21,2±1,5*

13,8±0,6*

1,9±0,1*

2,8±0,1*

91,4±3,3*

после лечения

40

20,1±1,4

13,9±0,6

2±0,1

2,8±0,1

70,4±3,5

3-я (контрольная)

20

15,9±3,2

11,4±0,9

1,2±0,1

2,04±0,3

26±4,5

 

Субпопуляционный состав лимфоцитов у больных с ИЗБА представлен в табл. 5. У всех обследованных пациентов был довольно низкий уровень Т-хелперов I (26,73+0,8%) и особенно Т-хелперов II (18,4+1,58%). В результате применения БРОНХО-МУНАЛА на фоне базисной терапии эти показатели значительно повысились, соотношение Тх-I/Tx-II нормализовалось (р<0,05); у больных, которых лечили без применения препарата, показатели изменялись незначительно (р>0,5). Пролиферативная активность лимфоцитов периферической крови у больных с ИЗБА до и после лечения БРОНХО-МУНАЛОМ представлена в табл. 6. Выраженность РБТЛ на ЛМ была существенно ниже нормы и достоверно не отличалась у всех обследованных больных (р>0,05). После терапии БРОНХО-МУНАЛОМ отмечено достоверное повышение интенсивности бластообразования лимфоцитов на ЛМ, Кон-А в обеих дозах. К концу лечения у больных наблюдали наиболее высокую интенсивность бластообразования в ответ на неспецифический митоген ЛМ, подтверждающую активацию функциональных свойств Т-лимфоцитов, в основном Т-хелперов I (CD4). Клинически это проявлялось более быстрым улучшением общего состояния больных по сравнению с таковым у лиц 2-й группы. При этом существенно уменьшались количество и длительность приема других препаратов, применяемых для базисной терапии.

Состояние гуморального иммунитета представлено в табл. 7. Количество В-лимфоцитов в результате лечения достоверно приближалось к показателям в норме у всех больных, количество IgG незначительно изменялось. У больных 1-й группы содержание IgE до лечения было значительно повышенным, после лечения БРОНХО-МУНАЛОМ снизилось до нормы. У больных 2-й группы эти показатели изменялись незначительно.

ВЫВОДЫ

Таким образом, комплексное лечение больных с ИЗБА БРОНХО-МУНАЛОМ способствует нормализации показателей количественной и функциональной активности иммунокомпетентных клеток. Каких-либо осложнений и эффектов, связанных с применением БРОНХО-МУНАЛА, не наблюдали.

Новый иммуномодулирующий препарат БРОНХО-МУНАЛ, созданный на основе бактериальных лизатов, является перспективным и достаточно эффективным средством у больных с ИЗБА.

Использование БРОНХО-МУНАЛА в современных условиях весьма целесообразно в комплексном лечении и профилактике обострений не только у пациентов с хроническими воспалительными заболеваниями верхних и нижних дыхательных путей, но и с БА.

Ссылки

  • 1. Вишнякова Л.А. (1990) Роль различных микроорганизмов и инфекционных процессов в возникновении и течении бронхиальной астмы. Терапевт. арх., 59–62.
  • 2. Гаращенко Т.И. (1999) Обоснование применения бактериальных иммуномодуляторов для профилактики и лечения заболеваний верхних дыхательных путей. Укр. мед. часопис, 1(9) (I–II): 27–30.
  • 3. Федосеев Г.Б. (1999) Механизмы обструкции бронхов. СПб Мед. информ., Укр. мед. часопис, 1(9) (I–II): 30–32.
  • 4. Bene M.C., Kahl L., Perruchet A.M. (1993) Bacterial lysates and ribosomes as inducers of specific immune responses: a comperative study. Scand. I. Immunol., 38: 496–499.
  • 5. Clot J. (1994) Immunite anti-infectiose. Mecanismes, lacteurs, specifique et non-specifique. Rev. Practicien., 44: 2505–2512.
  • 6. Emmerich B., Emslander H.P., Milatovic D., Hallek M. (1990) Effects of a bacterial extract on local immunity of the lung in pationts with chronic bronchitis. Lung., 168(Suppl.): 726–731.
  • 7. Murphy T.F. (1992) Sethi S. Bacterial infection in chronic obstructive pulmonary disease. Amer. Rev. Respir. Dis., 146: 1067–1083.
  • 8. Palma-Carlos A.G., Palma-Carlos M.L. (1990) Immunomodulation with bacterial extracts in respiratory diseases. Lung., 168(Suppl.): 732–736.
>ВПЛИВ БРОНХО-МУНАЛУ НА ІМУННИЙ СТАТУС ХВОРИХ З БРОНХІАЛЬНОЮ АСТМОЮ В ДИНАМІЦІ ЛІКУВАННЯ

Кузнєцова Лариса Володимирівна, Кравченко Є В, Осипова Л С, Назар О В, Грішило П В

Резюме. Вивчено вплив нового імуномодулятора бактеріального походження (БРОНХО-МУНАЛ) на показники кількісної та функціональної активності імунокомпетентних клітин хворих з інфекційнозалежною бронхіальною астмою (БА). Наведені також дані про найбільш ефективну дозу препарату. Доведено, що застосування БРОНХО-МУНАЛУ доцільно в комплексному лікуванні і профілактиці загострення БА.

Ключові слова:БРОНХО-МУНАЛ, імуностимуляція, бронхіальна астма, Т-лімфоцити, субпопуляція Т-лімфоцитів

>THE INFLUENCE OF BRONCHO-MUNAL ON IMMUNE STATE OF PATIENTS WITH BRONCHIAL ASTHMA IN DYNAMIC OF TREATMENT

Kuznetsova L V, Kravchenko E V, Osipova L S, Nazar O V, Grishilo P V

Summary. The article considers influence of a new bacterial Broncho-Munal on indices of functional activity of immunocompetent cells in patients with infectious bronchial asthma. The authors present data on the most acting dose of the medicine. The results of the study makes it possible to recommend BRONCHO-MUNAL for use in complex treatment and prophylaxis of exacerlatious of bronchial asthma.

Key words: BRONCHO-MUNAL, immunocompetent, bronchial asthma, T-lymphocyte, subpopulation T-lymphocyte