Вступ
У світі загальна поширеність артеріальної гіпертензії (АГ) у дорослих становить близько 30–45%. Згідно зі статистикою, станом на 2015 р. у 1,13 млрд осіб виявляли підвищений артеріальний тиск (АТ) (Chow C.K. et al., 2013; NCD Risk Factor Collaboration, 2017). Небіволол — антигіпертензивний засіб, високоселективний блокатор β1-адренорецепторів ІІІ покоління, який володіє вираженими вазодилативними властивостями за рахунок модуляції синтезу оксиду азоту в ендотеліальних клітинах судин (Sharp R.P., Gales B.J., 2017). Небіволол як активний фармацевтичний інгредієнт є рацемічною сумішшю D- та L-ізомерів. Антигіпертензивна активність небівололу за рахунок блокади β1-адренорецепторів більшою мірою пов’язана з активністю D-ізомера, а вазодилативна дія — L-ізомера (Vieira C.P. et al., 2017). Клінічно значуще зниження АТ та поліпшення судинорозширювальної функції ендотелію в пацієнтів із АГ під час застосування небівололу доведено у клінічних дослідженнях (Fongemie J., Felix-Getzik E., 2015; Cicero A.F.G. et al., 2018). Небіволол добре переноситься і значно рідше спричиняє небажані метаболічні ефекти порівняно з іншими блокаторами β-адренорецепторів (Marketou M. et al., 2017).
Оригінальним препаратом небівололу, ефективність і безпеку якого доведено у багатьох клінічних дослідженнях, є препарат Небілет®, таблетки по 5 мг небівололу, виробництва «Берлін-Хемі АГ» (Німеччина). В Україні у понад 12 млн осіб діагностовано АГ, і майже у половини пацієнтів із хворобами системи кровообігу підвищений рівень АТ (Сіренко Ю.М. та співавт., 2017; Долженко М.М. та співавт., 2018), тому для підвищення доступності сучасних засобів для лікування кардіологічних хворих ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця» розроблено генеричний аналог цього референтного препарату — Небіволол-Дарниця, таблетки по 5 мг небівололу.
Згідно із сучасними вимогами до реєстрації лікарських препаратів у країнах зі строгою регуляторною системою у сфері контролю над обігом лікарських засобів, а також в Україні, одним із ключових доказів ефективності генеричного лікарського засобу в твердій лікарській формі (в тому числі у таблетках) є підтвердження його біоеквівалентності порівняно з інноваційним (референтним) препаратом у клінічному випробуванні за участю здорових добровольців (МОЗ України, 2005; CPMP/EWP/QWP/1401/98/Rev.1/Corr; СТ-Н МОЗУ 42-7.2:2018). Це означає, що за результатами належним чином спланованого та проведеного клінічного випробування генеричний лікарський засіб порівняно з референтним лікарським засобом не повинен мати суттєвої різниці в біодоступності (тобто у швидкості й ступені, з якими діюча речовина всмоктується у системний кровообіг і стає доступною в місці дії активної субстанції) (СТ-Н МОЗУ 42-7.2:2018).
Важливим практичним результатом доведення біоеквівалентності генеричного лікарського засобу референтному препарату є можливість екстраполювати результати доклінічних і клінічних досліджень, що підтверджують ефективність та безпеку референтного лікарського засобу, на генеричний лікарський засіб (тобто ефекти цих лікарських засобів щодо ефективності та безпеки є по суті однаковими). Тому лікареві при виборі альтернативних лікарських засобів слід надавати перевагу препаратам із належним чином доведеною якістю, безпекою та ефективністю, щоб отримати прогнозований результат.
Мета — доведення біоеквівалентності лікарського засобу Небіволол-Дарниця, таблетки по 5 мг небівололу, виробництва ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця» (Україна), препарату Небілет®, таблетки по 5 мг небівололу, виробництва «Берлін-Хемі АГ» (Німеччина), шляхом порівняльного вивчення їх біодоступності при одноразовому прийомі натще здоровими добровольцями.
Об’єкт і методи дослідження
Клінічне дослідження з оцінки біоеквівалентності проведено відповідно до чинного законодавства України (МОЗ України, 2005; 2009а; 2009б; 2014; Верховна Рада України, 1996), міжнародних рекомендацій (ICH, 1997; Therapeutic Goods Administration, 2000; OECD, 2004; WHO TRS N 937, 2006; European Medicines Agency, 2010; Europese Commissie, 2013; EMA, 2015) та етичних принципів Гельсінської декларації (Всемирная медицинская ассоциация, 1964).
Спонсор дослідження — ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця».
Досліджувані препарати
Для проведення дослідження тестовий лікарський засіб Небіволол-Дарниця, таблетки по 5 мг небівололу (у формі небівололу гідрохлориду), надано компанією ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця». Препарат виробляється відповідно до міжнародного стандарту Належної виробничої практики (Good Manufacturing Practice — GMP). Як референтний лікарський засіб у дослідженні використано препарат Небілет®, таблетки по 5 мг небівололу (у формі небівололу гідрохлориду), виробництва «Берлін-Хемі АГ» (Німеччина). Згідно з протоколом препарати приймали одноразово натще, після 12-годинного голодування, у разовій дозі 5 мг небівололу (1 таблетка).
Суб’єкти дослідження
Клінічна частина дослідження проведена в медичному центрі ТОВ «Клініка ІННОФАР — Україна Інновейтів Фарма Ресерч» (Україна). Для участі в дослідженні запрошено 45 добровольців обох статей віком 18–55 років. Після надання інформованої згоди на участь у дослідженні та перевірки на відповідність вимогам критеріїв включення/невключення у дослідженні продовжили участь 42 здорових добровольці. Впродовж усього періоду дослідження режим харчування та фізичної активності добровольців були стандартизовані.
Дизайн дослідження
Дизайн дослідження — порівняльне рандомізоване перехресне з двома періодами і двома послідовностями (за схемою TR/RT) з «осліпленням» аналітичного етапу дослідження. Схематично дизайн дослідження зображено на рис. 1.
БЕ — біоеквівалентність; Т — тестовий лікарський засіб Небіволол-Дарниця; R — референтний лікарський засіб Небілет®.
Після проходження скринінгу та рандомізації, у І період дослідження здорові добровольці натще одноразово прийняли 1 таблетку лікарського засобу Небіволол-Дарниця (тестовий препарат «Т») або 1 таблетку лікарського засобу Небілет® (референтний препарат «R»). Після періоду «відмивання» добровольці, які в І період отримали препарат «Т», у ІІ період прийняли 1 таблетку препарату «R», а добровольці, які в І період отримали препарат «R», у ІІ період — 1 таблетку препарату «Т» (див. рис. 1). Таким чином, впродовж усього дослідження, сумарно за два періоди кожний доброволець отримав 10 мг небівололу.
Тривалість дослідження для кожного добровольця становила не більше 36 днів, включаючи скринінг, І період дослідження, період «відмивання», ІІ період дослідження та заключний візит.
Аналітична частина дослідження
Для оцінки фармакокінетичних параметрів у здорових добровольців у рамках кожного періоду випробування відібрано 21 пробу крові через 0; 0,25; 0,5; 0,75; 1; 1,25; 1,5; 1,75; 2; 2,5; 3; 3,5; 4; 5; 6; 8; 10; 12; 24; 36 і 48 год після одноразового прийому кожного з досліджуваних препаратів.
Аналітичну частину дослідження і статистичну обробку фармакокінетичних даних проведено в біоаналітичній лабораторії ТОВ «Квінта-Аналітика» (QUINTA-ANALYTICA s.r.o., м. Прага, Чеська Республіка). Діяльність лабораторії згідно з вимогами Належної лабораторної практики (GLP) сертифіковано чеським регуляторним органом. Кількісне визначення небівололу в плазмі крові у здорових добровольців проводили методом високоефективної рідинної хроматографії з тандемним мас-селективним детектуванням. Нижня межа кількісного визначення небівололу в зразках плазми крові становила 0,020 нг/мл. Метод валідовано в зазначеній біоаналітичній лабораторії згідно з міжнародними та українськими рекомендаціями (Жукова Н.А. и соавт., 2013; EMA, 2015).
Статистичний аналіз
У ході статистичного аналізу фармакокінетичних даних побудовано профілі залежності концентрації небівололу від часу для кожного препарату і добровольця у вихідних та логарифмічно перетворених одиницях. На основі отриманих експериментальних даних визначено такі параметри фармакокінетики: максимальну концентрацію (Cmax) небівололу у плазмі крові, час досягнення максимальної концентрації (Tmax), площу під фармакокінетичною кривою з моменту прийому лікарського засобу до останньої точки, що визначається (AUC0–t), площу під фармакокінетичною кривою, екстрапольовану до нескінченності (AUC0–∞), константу швидкості елімінації (Kel) та період напіввиведення (T½). Для показників Cmax, AUC0–t, AUC0–∞ проведено багатофакторний дисперсійний аналіз, що ґрунтувався на змішаній моделі.
Для оцінки біоеквівалентності лікарського засобу Небіволол-Дарниця, таблетки, лікарському засобу Небілет®, таблетки, розраховано 90% довірчі інтервали (ДІ) відношення геометричних середніх значень показників Cmax та AUC0–t, а також AUC0–∞ (додатково для підтвердження оцінки біоеквівалентності). Препарати вважали біоеквівалентними, якщо верхня та нижня межі зазначених ДІ знаходилися в діапазоні 80–125,00% (European Medicines Agency, 2010; МОЗ України, 2014).
Статистичну обробку фармакокінетичних даних виконано за допомогою програмного забезпечення «Software Phoenix WinNonlin®» (версія 7.0), «SAS®» (версія 9.4) та «MS Excel 2007».
Оцінка переносимості
Переносимість досліджуваних препаратів оцінювали на підставі реєстрації побічних реакцій/побічних явищ, результатів фізикального та лабораторно-інструментального обстеження.
Результати та їх обговорення
Дослідження розпочато після отримання дозволу Міністерства охорони здоров’я України (МОЗ України, 2017) та схвалення Комісії з питань етики при ТОВ «Клініка ІННОФАР — Україна Інновейтів Фарма Ресерч».
Під час скринінгу 45 добровольців підписали інформовану згоду на участь у дослідженні. За результатами скринінгу 42 здорових добровольці відповідали всім критеріям включення та жодному з критеріїв невключення (з них 21 чоловік і 21 жінка, середній вік — 37,1±7,54 року). 40 добровольців завершили участь у дослідженні; 1 доброволець достроково вибув у зв’язку з побічним явищем, що виникло у нього в період «відмивання», і 1 добровольця виключено з дослідження до прийому першої дози у зв’язку з недотриманням ним обмежень, передбачених протоколом дослідження. Розподіл добровольців в ході цього дослідження представлено на рис. 2.
| 45 добровольців пройшли обстеження в рамках скринінгу | → | 3 добровольці не відповідали критеріям включення або відповідали критеріям невключення |
| ↓ | ||
| 42 добровольці відповідали всім критеріям включення та жодному з критеріїв невключення |
1 доброволець вибув із дослідження у зв’язку з порушенням протоколу в день 0 періоду І; 1 доброволець вибув із дослідження достроково (у зв’язку з розвитком побічного явища) в період «відмивання» (включено в аналіз безпеки) |
|
| ↓ | ||
| 42 добровольці рандомізовано | → | |
| ↓ | ||
| 40 добровольців повністю завершили дослідження згідно з протоколом |
За результатами визначення індивідуальних концентрацій небівололу в плазмі крові добровольців після прийому однієї дози тестового і референтного препаратів отримано такі криві залежності концентрація — час (рис. 3).
На основі індивідуальних концентрацій небівололу в плазмі крові добровольців розраховано всі основні фармакокінетичні показники та другорядні параметри, які підтверджують біоеквівалентність лікарських засобів (табл. 1).
| Препарат | Сmax, нг/мл | Tmax, год | AUC0–t, нг · год/мл |
AUC0–∞, нг · год/мл |
Kel, год–1 | T½, год |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Небіолол-Дарниця | 2,282±1,961 | 1,38±1,03 | 26,954±50,678 | 42,022±89,383 | 0,04728±0,01485 | 17,23±9,29 |
| Небілет® | 2,228±1,993 | 1,51±1,10 | 27,745±52,206 | 41,158±86,617 | 0,04930±0,01445 | 16,21±8,85 |
Межі 90% ДІ для відношення геометричних середніх значень Cmax та AUC0–t для препаратів Небіволол-Дарниця та Небілет® становили 95,37–110,30% та 92,70–102,75% відповідно. Отже, отримані результати повністю задовольняють критерій біоеквівалентності (80,00–125,00%) для AUC0–t та Cmax для небівололу (табл. 2). Межі 90% ДІ для відношення геометричних середніх AUC0–∞ для досліджуваних препаратів (94,40–104,49%) також повністю відповідають критерію прийнятності щодо біоеквівалентності.
| Параметр | Геометричне середнє, LSM |
Відношення T/R, % | 90% ДІ | Висновок про БЕ | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| n | T | n | R | Нижня межа | Верхня межа | |||
| AUC0–t, нг · год/мл | 40 | 10,155 | 40 | 10,405 | 97,59 | 92,70 | 102,75 | ТАК |
 |
||||||||
| Cmax, нг/мл | 40 | 1,788 | 40 | 1,743 | 102,57 | 95,37 | 110,30 | ТАК |
 |
||||||||
Таким чином, спираючись на результати аналізу Cmax та AUC0–t небівололу у здорових добровольців, можна зробити висновок, що генеричний лікарський засіб Небіволол-Дарниця, таблетки по 5 мг небівололу, виробництва ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця», є біоеквівалентним референтному лікарському засобу Небілет®, таблетки по 5 мг небівололу, виробництва «Берлін-Хемі АГ» (Німеччина).
До аналізу переносимості включено дані всіх добровольців, які отримали дозу досліджуваних препаратів (n=41, включаючи 1 добровольця, який отримав препарат лише в І період). Після прийому здоровими добровольцями досліджуваних препаратів у разовій дозі 5 мг небівололу зареєстровано 3 випадки побічних реакцій/побічних явищ у 3 добровольців. З них 2 випадки побічних реакцій/побічних явищ (запаморочення, 1 випадок після прийому тестового і 1 — референтного препарату) класифіковано як передбачувані (зазначено в інструкції для медичного застосування препарату Небілет®). Один зареєстрований випадок побічних явищ — гострий флебіт верхньої кінцівки — не пов’язаний із прийомом досліджуваного препарату.
Усі зареєстровані випадки побічних реакцій/побічних явищ були несерйозними, легкого та середнього ступеня тяжкості; 1 випадок побічних явищ (гострий флебіт правої верхньої кінцівки) потребував медикаментозного лікування і передчасного виключення добровольця з дослідження. Результат усіх побічних реакцій/побічних явищ — одужання без залишкових явищ.
Отже, аналіз результатів обстеження 41 здорового добровольця в ході проведеного дослідження свідчить про порівняну переносимість після одноразового застосування лікарських засобів Небіволол-Дарниця, таблетки по 5 мг небівололу, виробництва ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця» (Україна), і Небілет®, таблетки по 5 мг небівололу, виробництва «Берлін-Хемі АГ» (Німеччина).
Висновки
1. Результати проведеного із дотриманням міжнародних стандартів клінічного дослідження за участю здорових добровольців доводять біоеквівалентність лікарського засобу Небіволол-Дарниця, таблетки по 5 мг небівололу (у формі небівололу гідрохлориду), виробництва ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця», референтному лікарському засобу Небілет®, таблетки по 5 мг небівололу (у формі небівололу гідрохлориду), виробництва «Берлін-Хемі АГ» (Німеччина).
2. За даними клінічного випробування обидва лікарські засоби характеризувалися подібним профілем безпеки.
Спонсор дослідження ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця» висловлює подяку співробітникам медичного центру ТОВ «Клініка ІННОФАР — Україна Інновейтів Фарма Ресерч» (Україна) та біоаналітичної лабораторії ТОВ «Квінта-Аналітика» (QUINTA-ANALYTICA s.r.o., Прага, Чеська Республіка), які зробили свій внесок у проведення дослідження та обробку його результатів.
Статтю підготовлено за фінансової підтримки ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця».
Список використаної літератури
- Верховна Рада України (1996) Закон України від 04.04.1996 р. «Про лікарські засоби» (у поточній редакції) (https://zakon.rada.gov.ua/laws/show/123/96-%D0%B2%D1%80).
- Всемирная медицинская ассоциация (1964) Хельсинкская декларация Всемирной медицинской ассоциации. Этические принципы для медицинских исследований с привлечением человека в качестве субъекта (с изменениями) (http://uacm.kharkov.ua/download/2014_11/22.pdf).
- Долженко М.М., Давидова І.В., Шершнева О.В. (2018) Європейські рекомендації з ведення хворих на артеріальну гіпертензію 2018: фокус на ішемічну хворобу серця. Медична газета «Здоров’я України 21 сторіччя», 15–16(436–437): 35–36.
- Жукова Н.А., Либина В.В., Кудрис И.В., Падалко Н.Н. (2013) Валидация биоаналитического метода: Метод. рекомендации. ГЭЦ МЗ Украины, Киев, 35 с.
- МОЗ України (2005) Наказ МОЗ України від 26.08.2005 р. № 426 «Про затвердження Порядку проведення експертизи реєстраційних матеріалів на лікарські засоби, що подаються на державну реєстрацію (перереєстрацію), а також експертизи матеріалів про внесення змін до реєстраційних матеріалів протягом дії реєстраційного посвідчення» (https://zakon2.rada.gov.ua/laws/show/z1069-05).
- МОЗ України (2009a) Наказ МОЗ України від 23.09.2009 р. № 690 «Про затвердження Порядку проведення клінічних випробувань лікарських засобів та експертизи матеріалів клінічних випробувань і Типового положення про комісії з питань етики» (https://zakon1.rada.gov.ua/laws/show/z1010-09).
- МОЗ України (2009б) Наказ МОЗ України від 16.02.2009 р. № 95 «Про затвердження документів з питань забезпечення якості лікарських засобів» (у поточній редакції) (https://zakon5.rada.gov.ua/rada/show/v0095282-09).
- МОЗ України (2014) Наказ МОЗ України від 02.11.2018 р. № 2014 «Про внесення змін до настанови «Лікарські засоби. Дослідження біоеквівалентності» (http://moz.gov.ua/article/ministry-mandates/nakaz-moz-ukraini-vid-02112018–2014-pro-vnesennja-zmin-do-nastanovi-likarski-zasobi-doslidzhennja-bioekvivalentnosti).
- МОЗ України (2017) Наказ МОЗ України від 25.09.2017 р. № 1167 «Про проведення клінічних випробувань лікарських засобів та затвердження суттєвих поправок» (http://old.moz.gov.ua/ua/portal/dn_20170925_1167.html).
- Сіренко Ю.М., Лутай М.І., Несукай О.Г. та ін. (2017) Контроль артеріальної гіпертензії в Україні: висновки експертів. Медична газета «Здоров’я України 21 сторіччя», 24(421): 5–7.
- Chow C.K., Teo K.K., Rangarajan S. et al. (2013) Prevalence, awareness, treatment, and control of hypertension in rural and urban communities in high-, middle-, and low-income countries. JAMA, 310(9): 959–968.
- Cicero A.F.G., Kuwabara M., Borghi C. (2018) A critical review of nebivolol and its fixed-dose combinations in the treatment of hypertension. Drugs, 78(17): 1783–1790.
- Europese Commissie (2013) Directive 2001/20/EC of the European Parliament and of the Council of 4 April 2001 on the approximation of the laws, regulations and administrative provisions of the Member States relating to the implementation of good clinical practice in the conduct of clinical trials on medicinal products for human use (http://ec.europa.eu/health/files/eudralex/vol-10/ctqa_v11.pdf; http://ec.europa.eu/health/files/clinicaltrials/2012_07/summary/2012_07_summary_en.pdf).
- European Medicines Agency (2010) Guideline on the investigation of bioequivalence (https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-guideline/guideline-investigation-bioequivalence-rev1_en.pdf).
- EMA (2015) Guideline on bioanalytical method validation (https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-guideline/guideline-bioanalytical-method-validation_en.pdf).
- ICH (1997) ICH Topic E 6. Guideline for Good Clinical Practice (https://docplayer.net/6804865-Ich-topic-e-6-guideline-for-good-clinical-practice-note-for-guidance-on-good-clinical-practice-cpmp-ich-135-95.html).
- OECD (2004) The OECD principles of good laboratory practice (GLP) (http://www.oecd.org/chemicalsafety/testing/oecdseriesonprinciplesofgoodlaboratorypracticeglpandcompliancemonitoring.htm).
- Therapeutic Goods Administration (2000) Note for guidance on good clinical practice (CPMP/ICH/135/95) (https://www.tga.gov.au/sites/default/files/ich13595an.pdf).
- Fongemie J., Felix-Getzik E. (2015) A review of nebivolol pharmacology and clinical evidence. Drugs, 75(12): 1349–1371.
- Marketou M., Gupta Y., Jain S., Vardas P. (2017). Differential metabolic effects of beta-blockers: an updated systematic review of nebivolol. Current Hypertension Reports, 19(3): 22.
- NCD Risk Factor Collaboration (2017) Worldwide trends in blood pressure from 1975 to 2015: a pooled analysis of 1479 population-based measurement studies with 19.1 million participants. Lancet, 389: 37–55.
- Sharp R.P., Gales B.J. (2017) Nebivolol versus other beta blockers in patients with hypertension and erectile dysfunction. Ther. Adv. Urol., 9(2): 59–63.
- Vieira C.P., Neves D.V., Cesarino E.J. et al. (2017) An indirect stereoselective analysis of nebivolol glucuronides in plasma by LC-MS/MS: Application to clinical pharmacokinetics. J. Pharm. Biomed. Anal., 144: 25–30.
- WHO TRS N 937 (2006) Additional guidance for organization performing in vivo bioequivalence studies. — Annex 9.
Резюме. Цель — в сравнительном рандомизированном перекрестном с двумя периодами и двумя последовательностями (по схеме TR/RT) клиническом исследовании с участием здоровых добровольцев доказать биоэквивалентность лекарственного средства Небиволол-Дарница, таблетки по 5 мг небиволола, производства ЧАО «Фармацевтическая фирма «Дарница» (Украина), референтному лекарственному средству Небилет®, таблетки по 5 мг небиволола, производства «Берлин-Хеми АГ» (Германия). Объект и методы исследования. Добровольцы обоих полов однократно натощак принимали тестовый и референтный препараты в дозе 5 мг небиволола. Пробы крови отбирали в течение 48 ч. Количественное определение небиволола в плазме крови добровольцев проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-селективным детектированием. Результаты. В анализ фармакокинетических показателей включены данные 40 здоровых добровольцев. Средние значения Cmax для тестового препарата Небиволол-Дарница и референтного препарата Небилет® составляли 2,282±1,961 и 2,228±1,993 нг/мл соответственно, а средние значения AUC0–t — 26,954±50,678 и 27,745±52,206 нг‧ч/мл соответственно. Границы 90% доверительных интервалов для отношения геометрических средних значений Cmax (95,37–110,30%) и AUC0–t (92,70–102,75%) для препаратов Небиволол-Дарница и Небилет® соответствуют предварительно установленным критериям биоэквивалентности (80,00–125,00%). Предвиденные побочные реакции/явления отмечали у 2 добровольцев и расценивали как несерьезные. Выводы. Доказана биоэквивалентность лекарственного средства Небиволол-Дарница, таблетки по 5 мг, препарату Небилет®, таблетки по 5 мг, в соответствии с требованиями Руководства СТ-Н МОЗУ 42-7.2:2018. Оба препарата характеризовались хорошей переносимостью при однократном пероральном применении натощак.
Ключевые слова: биоэквивалентность, небиволол, таблетки, здоровые добровольцы, генерик, референтный препарат, ВЭЖХ МС/МС.
Адреса для листування:
Дорошенко Андрій Михайлович
02093, Київ, вул. Бориспільська, 13
ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця»
E-mail: [email protected]
