ВЛИЯНИЕ БРОНХО-МУНАЛА НА ИММУННЫЙ СТАТУС БОЛЬНЫХ С БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ В ДИНАМИКЕ ЛЕЧЕНИЯ

 

ВВЕДЕНИЕ

 

В последние годы основное внимание уделяется патогенетическому подходу к лечению больных с бронхиальной астмой (БА) (Вишнякова Л.А., 1990; Гаращенко Т.И., 1999; Федосеев Г.Б, 1999; Palma-Carlos A.G., Palma-Carlos M.L., 1990). В настоящее время экспериментально и клинически доказано, что БА — иммунозависимое заболевание, в патогенезе которого особое значение имеют нарушения как клеточного, так и гуморального звена иммунной системы, а также изменения местного иммунитета дыхательных путей (Emmerich B. et al., 1990; Clot J., 1994).

Учитывая, что при БА отмечают нарушение целого ряда показателей иммунитета, под воздействием инфекционного агента может произойти еще более глубокое угнетение иммунного ответа, обусловленное как экзо-, так и эндотоксинами, высвобождающимися вследствие бактериолиза. При этом иммуностимуляции, усиливающейся с увеличением количества возбудителей, противостоит ею же обусловленная иммуносупрессия. Наряду с опасностью рецидива повышается вероятность перехода заболевания из острой формы в хроническую. В связи с этим представляется весьма целесообразной иммуностимуляция бактериальными антигенами, лишенными иммуносупрессивного компонента. Традиционная терапия не позволяет элиминировать персистенцию бактериальных агентов. Это объясняет необходимость применения бактериальных вакцин.

Одним из препаратов, относящихся к подобным вакцинам, является БРОНХО-МУНАЛ («Lek Pharmaceutical and Chemical Company», Slovenia). Препарат содержит лиофилизированный лизат 8 бактерий, которые чаще всего являются возбудителями инфекций верхних дыхательных путей: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Klebsiella ozaenae, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Streptococcus viridans, Streptococcus piogenes, Branhamella catar-rhalis. Компоненты препарата индуцируют антигеноспецифический иммунный ответ, поликлональную стимуляцию В-клеток, а также активацию макрофагов. БРОНХО-МУНАЛ повышает активность NK-клеток, увеличивает выработку цитокинов, количество циркулирующих Т-лимфоцитов, повышает уровень IgA, IgG, IgM, а также содержание иммуноглобулинов в секрете дыхательных путей. Противопоказаний к применению препарата нет.

ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Цель нашего исследования — изучение иммунологической реактивности организма до и после применения БРОНХО-МУНАЛА курсом длительностью 10 и 30 дней в комплексной терапии пациентов с БА. Иммунологическое обследование проводили у 97 больных с инфекционнозависимой БА (ИЗБА), при лечении которых применяли БРОНХО-МУНАЛ, — 1-я (основная) группа, у 40 — с ИЗБА, при базисном лечении которых не использовали БРОНХО-МУНАЛ (2-я, группа сравнения), и у 20 практически здоровых лиц (3-я, контрольная группа).

Работ, посвященных изучению влияния БРОНХО-МУНАЛА на показатели системного и местного иммунитета у пациентов с ИЗБА, мы не обнаружили. Разноречивы также данные о наиболее эффективных дозах препарата, способах его введения и сроках проводимого лечения.

Для определения наиболее эффективной дозы БРОНХО-МУНАЛА сравнивали влияние препарата (в дозах 0,014; 0,14 и 1,4 мкг/мл) в реакции активного розеткообразования у пациентов 1-й и 3-й групп.

Доказано, что эффективность БРОНХО-МУНАЛА в дозе 0,14 мкг/мл соответствует таковой в стандартной дозе; минимальную дозу (0,014 мкг/мл) использовали для выявления высокой чувствительности иммунокомпетентных клеток к препарату; максимальную — для определения низкой чувствительности. Положительным считали эффект при различии показателей в 1-й и 3-й группах более 20%.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Данные об изменении экспрессии лимфоцитов после инкубации их при воздействии БРОНХО-МУНАЛА в различных дозах представлены в табл. 1.

Таблица 1

Влияние БРОНХО-МУНАЛА на лимфоциты у больных с ИЗБА
в реакции активного розеткообразования в зависимости от дозы

Еа-РОК	Доза, мкг/мл			% стимуляции/угнетения при дозе, мкг/мл
	0,014	0,14	1,4	0,014	0,14	1,4
25,91±1,27	32±2,14*	38,91± 2,01*	33,8± 2,01*	37,62± 6,12	61,34± 6,81*	52,01± 9,01

* Различия между значениями Еа-РОК у лиц 1-й и 3-й групп достоверны (р<0,15).

 Наиболее выраженное действие отмечено при средней дозе препарата (соответствующей стандартной). Оценивали эффективность дозы с учетом исходного количества Еа-розеткообразующих клеток (Еа-РОК) в периферической крови больных. Для этого пациенты были распределены на группы в зависимости от содержания Еа-РОК: нормальное, умеренно сниженное и значительно сниженное (табл. 2). У лиц 3-й (контрольной) группы не было отмечено изменения количества Еа-РОК после инкубации с БРОНХО-МУНАЛОМ ни в одной дозе. Уровень активного розеткообразования под влиянием БРОНХО-МУНАЛА изменяется в зависимости от исходного количества Еа-РОК в крови.

Таблица 2

Влияние БРОНХО-МУНАЛА на уровень Еа-РОК у больных с ИЗБА в зависимости от исходного уровня иммунологической реактивности

Группа обследованных лиц	Количество	Исходное содержание Еа-РОК	Еа-РОК+БРОНХО-МУНАЛ
			Контроль	Концентрации	1-я группа	% стабилиза-ции / угнетения
Больные с нормальным уровнем Еа-РОК (26±3,2%)	30	28,3±0,45	28,51±0,61	I	31,41±2,61	17,12±4,3
				II	36,12±1,01*	26,37±2,41
				III	32,81±1,9	16,1±5,61
Больные с умеренно сниженным уровнем Еа-РОК (14,8±5%)	60	19,4±0,41	18,71±0,7	I	26,71±1,28*	44,16±5,2
				II	30,9±1,8*	65,32±7,35
				III	27,62±1,52*	52,97±7,6
Больные с резко сниженным уровнем Еа-РОК (10,1±1,5%)	47	11,02±0,31	12,02±0,52	I	15,74±0,6*	37,15±5,13
				II	19,25±0,77*	67,9±7,38
				III	18,39±0,75	59,82±6,27
3-я (контрольная)	20	29,6±1,8	27,50±1,4	I	30,1±0,71	—
				II	26,4±1,61	—
				III	25,77±2	—

* Достоверность различий между показателями у лиц 1-й и 3-й групп (р<0,05).

Так, при содержании Еа-РОК в крови в пределах нормы препарат в средней дозе оказывал стимулирующее действие, а после инкубации лимфоцитов с минимальной и максимальной концентрацией БРОНХО-МУНАЛА достоверных изменений в реакции Еа-РОК не зарегистрировано.

У больных с умеренно и значительно сниженным относительным содержанием Еа-РОК в крови БРОНХО-МУНАЛ оказывал стимулирующее действие на уровне активного розеткообразования независимо от дозы. Необходимо отметить, что наиболее активно розеткообразование происходило под воздействием БРОНХО-МУНАЛА в средней дозе и не зависело от исходного состояния иммунологической активности.

Таким образом, БРОНХО-МУНАЛ оказывал иммуномодулирующий эффект на розеткообразующую способность Т-лимфоцитов у больных с ИЗБА: минимально выраженный — при уровне Еа-РОК в пределах нормы, стимулирующий — при исходно низком уровне. Эффект воздействия БРОНХО-МУНАЛА зависит от степени угнетения розеткообразующей способности Т-лимфоцитов и дозы препарата.

Мы провели исследования индивидуальной чувствительности Т-лимфоцитов к БРОНХО-МУНАЛУ (табл. 3). У 88,7% больных отмечена чувствительность при назначении препарата в среднетерапевтической дозе, у 7,2% — в минимальной, а у 2% — в максимальной дозе. Поэтому для лечения больных применяли БРОНХО-МУНАЛ в средней дозе.

Таблица 3

Стимулирующее влияние БРОНХО-МУНАЛА in vitro  в реакции Еа-РОК 

Стимулирующее влияние бронхо-мунала в дозе:	n=97
	Абс. число	%
минимальной (I доза)	7	7,2
среднетерапевтической (II доза)	86	88,7
максимальной (III доза)	2	2
Отсутствие стимуляции независимо от дозы	2	2

Для оценки состояния иммунологической реактивности организма до и после лечения учитывали комплекс иммунологических показателей — содержание Е-РОК, Еа-РОК, ЕАС-РОК, РБТЛ на ЛМ, Кон-А в концентрации 20 и 40 мкг/мл для определения функциональной активности Т-хелперов I и II, субпопуляционный состав Т-клеток (CD3, CD4, CD8).

Исходное состояние иммунологической реактивности больных с ИЗБА было вполне сопоставимым. Сведения об иммунокорригирующих свойствах БРОНХО-МУНАЛА представлены в табл. 4–7. Результаты анализа изменений состояния клеточного иммунитета у больных свидетельствуют, что у пациентов изучаемых групп установлен достоверно более низкий уровень относительного числа T-клеток (CD3), а у лиц 3-й (контрольной) группы — тенденция к увеличению их числа (см. табл. 4).

 

Таблица 4

Содержание лимфоцитов у больных с ИЗБА в реакции Еа-РОК до и после иммунотропной терапии БРОНХО-МУНАЛОМ (M+m)

 

Еа-РОК (контроль)	Срок обследования	Доза, мг/мл
		I — 0,7	II — 7	III — 70
25,81±1,2	а	32,02±1,17*	38,96±2,04*	33,83±2,01*
37,16±0,92	б	48,6±1,68*	40,11±1,12*	46,81±1,28*

Примечание:
а — до лечения; б — после лечения.
* Достоверность различий до и после лечения (р<0,05).

Таблица 5

Субпопуляционный состав Т-клеток у больных с ИЗБА  до и после лечения БРОНХО-МУНАЛОМ (M+m)

Группа обсле-дованных лиц	Коли-чество	Субпопуляционный состав Т-лимфоцитов (%)
		CD3	CD4	CD8	CD4/CD8
1-я (основная) до лечения после лечения
	97	47,5±1,12*	26,73±0,8*	18,4±1,58	1,34±0,09*
	97	56,7±1,9**	37,75±2,9*	21,15±2,5**	1,52±0,09**
2-я (сравнения) до лечения после лечения
	40	47,5±1,2	26,73±0,8*	18,4±1,58*	1,54±0,09*
	40	50,9±1,2	27,9±0,8	19,4±1,5	1,42±0,09
3-я (контрольная)	20	60,4±0,21	35,4±0,35	25,1±0,5	1,5±0,04

* Достоверность различий по сравнению с показателями у лиц 3-й группы (р<0,05).
** Достоверность с данными до лечения (р<0,005);
то же в табл. 6, 7.

 Таблица 6

Пролиферативная активность лимфоцитов периферической крови у больных с ИЗБА  до и после лечения БРОНХО-МУНАЛОМ (M+m)

Группа обследованных лиц

Количество

 

РБТЛ (индекс стимуляции)

 

ЛМ

 

Кон-А
(20 мкг/мл)

 

Кон-А
(40 мкг/мл)

1-я (основная)до лечения

97

15,9±1,2*

6,5±0,2*

3,2±0,1*

после лечения

97

25,1±1,2**

10,2±1,2*

5,1±0,2**

2-я (сравнения)до лечения

40

15,9±1,2*

6,5±0,2*

3,2±0,1*

после лечения

40

16,9±1,1

7,3±0,1

4,1±0,2

3-я (контрольная)

20

26,7±2,1

16,5±1,2

8,1±0,2

 

Таблица 7

Состояние В-звена иммунитета у больных с ИЗБА  до и после лечения БРОНХО-МУНАЛОМ (M+m)

Группа обсле-дованных лиц

Коли-чество

 

ЕАС-РОК (%)

 

IgG (г/л)

 

IgM (г/л)

 

IgA (г/л)

 

IgE общ. (Ке/л)

1-я (основная)до лечения

97

21,2±1,5*

13,8±0,6*

1,9±0,1*

2,8±0,1*

91,4±8,3*

после лечения

97

16,5±2**

13,4±0,5**

2,1±0,1**

2,8±0,1**

21,3±9,1**

2-я (сравнения)до лечения

40

21,2±1,5*

13,8±0,6*

1,9±0,1*

2,8±0,1*

91,4±3,3*

после лечения

40

20,1±1,4

13,9±0,6

2±0,1

2,8±0,1

70,4±3,5

3-я (контрольная)

20

15,9±3,2

11,4±0,9

1,2±0,1

2,04±0,3

26±4,5

 

Субпопуляционный состав лимфоцитов у больных с ИЗБА представлен в табл. 5. У всех обследованных пациентов был довольно низкий уровень Т-хелперов I (26,73+0,8%) и особенно Т-хелперов II (18,4+1,58%). В результате применения БРОНХО-МУНАЛА на фоне базисной терапии эти показатели значительно повысились, соотношение Тх-I/Tx-II нормализовалось (р<0,05); у больных, которых лечили без применения препарата, показатели изменялись незначительно (р>0,5). Пролиферативная активность лимфоцитов периферической крови у больных с ИЗБА до и после лечения БРОНХО-МУНАЛОМ представлена в табл. 6. Выраженность РБТЛ на ЛМ была существенно ниже нормы и достоверно не отличалась у всех обследованных больных (р>0,05). После терапии БРОНХО-МУНАЛОМ отмечено достоверное повышение интенсивности бластообразования лимфоцитов на ЛМ, Кон-А в обеих дозах. К концу лечения у больных наблюдали наиболее высокую интенсивность бластообразования в ответ на неспецифический митоген ЛМ, подтверждающую активацию функциональных свойств Т-лимфоцитов, в основном Т-хелперов I (CD4). Клинически это проявлялось более быстрым улучшением общего состояния больных по сравнению с таковым у лиц 2-й группы. При этом существенно уменьшались количество и длительность приема других препаратов, применяемых для базисной терапии.

Состояние гуморального иммунитета представлено в табл. 7. Количество В-лимфоцитов в результате лечения достоверно приближалось к показателям в норме у всех больных, количество IgG незначительно изменялось. У больных 1-й группы содержание IgE до лечения было значительно повышенным, после лечения БРОНХО-МУНАЛОМ снизилось до нормы. У больных 2-й группы эти показатели изменялись незначительно.

ВЫВОДЫ

Таким образом, комплексное лечение больных с ИЗБА БРОНХО-МУНАЛОМ способствует нормализации показателей количественной и функциональной активности иммунокомпетентных клеток. Каких-либо осложнений и эффектов, связанных с применением БРОНХО-МУНАЛА, не наблюдали.

Новый иммуномодулирующий препарат БРОНХО-МУНАЛ, созданный на основе бактериальных лизатов, является перспективным и достаточно эффективным средством у больных с ИЗБА.

Использование БРОНХО-МУНАЛА в современных условиях весьма целесообразно в комплексном лечении и профилактике обострений не только у пациентов с хроническими воспалительными заболеваниями верхних и нижних дыхательных путей, но и с БА.

Ссылки

• 1. Вишнякова Л.А. (1990) Роль различных микроорганизмов и инфекционных процессов в возникновении и течении бронхиальной астмы. Терапевт. арх., 59–62.
• 2. Гаращенко Т.И. (1999) Обоснование применения бактериальных иммуномодуляторов для профилактики и лечения заболеваний верхних дыхательных путей. Укр. мед. часопис, 1(9) (I–II): 27–30.
• 3. Федосеев Г.Б. (1999) Механизмы обструкции бронхов. СПб Мед. информ., Укр. мед. часопис, 1(9) (I–II): 30–32.
• 4. Bene M.C., Kahl L., Perruchet A.M. (1993) Bacterial lysates and ribosomes as inducers of specific immune responses: a comperative study. Scand. I. Immunol., 38: 496–499.
• 5. Clot J. (1994) Immunite anti-infectiose. Mecanismes, lacteurs, specifique et non-specifique. Rev. Practicien., 44: 2505–2512.
• 6. Emmerich B., Emslander H.P., Milatovic D., Hallek M. (1990) Effects of a bacterial extract on local immunity of the lung in pationts with chronic bronchitis. Lung., 168(Suppl.): 726–731.
• 7. Murphy T.F. (1992) Sethi S. Bacterial infection in chronic obstructive pulmonary disease. Amer. Rev. Respir. Dis., 146: 1067–1083.
• 8. Palma-Carlos A.G., Palma-Carlos M.L. (1990) Immunomodulation with bacterial extracts in respiratory diseases. Lung., 168(Suppl.): 732–736.