Біоеквівалентність лікарського засобу Превентор (розувастатин), таблетки, вкриті плівковою оболонкою, референтному лікарському засобу Крестор (розувастатин), таблетки, вкриті плівковою оболонкою, за результатами рандомізованого перехресного клінічного дослідження у здорових добровольців

Вступ

Зростання рівня холестерину ліпопротеїнів низької щільності (ХС ЛПНЩ) у крові є фактором ризику ішемічної хвороби серця (ІХС), що пов’язано з їх визначальною роллю в розвитку й прогресуванні атеросклерозу (Roger V.L. et al., 2011; Morris P.B. et al., 2014). Тому в настановах із профілактики та лікування серцево-судинних захворювань (ССЗ) дотримання цільових значень рівня ліпідів крові, особливо ХС ЛПНЩ, ідентифіковано як ключовий підхід щодо зниження серцево-судинного ризику (Fedder D.O. et al., 2002; Grundy S. et al., 2002; Lewis S.J., 2011; Reiner Z. et al., 2011; Morris P.B. et al., 2014).

На сьогодні статини включено в терапію першої лінії для профілактики ССЗ (Jellinger P.S. et al., 2017). Статини блокують ранній етап біосинтезу холестерину в гепатоцитах, підвищують у цих клітинах експресію рецепторів до ЛПНЩ і внаслідок цього інтенсифікують захоплення печінкою цього класу атерогенних ліпопротеїнів з плазми крові (Endo A., 2010; McFarland A.J. et al., 2014).

Розувастатин — один із найбільш вивчених статинів, який застосовують у клінічній практиці вже понад 15 років. У дозах 5–40 мг/добу розувастатин знижує рівень ХС ЛПНЩ на 46–55%, що вище ніж для інших статинів в еквівалентній дозі. Більш висока фармакологічна активність розувастатину розглядається як певна перевага порівняно з іншими представниками цієї групи препаратів з огляду на достатньо низьку біодоступнісь статинів. Проміжок часу, впродовж якого концентрація розувастатину в плазмі крові знижується вдвічі (період напіввиведення — T_½), становить 19 год, що дозволяє застосовувати цей лікарський засіб один раз на добу (Pappa E. et al., 2019).

Незважаючи на те що в Україні ІХС займає провідне місце у структурі смертності населення, коли майже кожен 2-й українець (46%) помирає від ІХС, у нашій країні недостатньо уваги приділяють запобіганню несприятливих наслідків ССЗ (Теренда Н.О., 2015; Гандзюк А.В. та співавт., 2017).

Клінічні дані свідчать, що зростання рівня ХС ЛПНЩ на 10% супроводжується зростанням ризику розвитку ІХС на 20%, тому статини, які є засобами, що ефективно знижують рівень ХС ЛПНЩ, мають ключову роль у веденні пацієнтів із коронарним атеросклерозом (Wood D. et al., 1998). Для підвищення доступності сучасних лікарських засобів з метою запобігання і лікування ССЗ ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця» розроблено генеричний аналог оригінального лікарського засобу розувастатину — Превентор, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, по 10 та 20 мг розувастатину.

Відповідно до сучасних вимог щодо реєстрації лікарських засобів у країнах зі строгою регуляторною системою у сфері контролю над обігом лікарських засобів, до яких належить Україна, одним із ключових доказів ефективності та безпеки генеричного лікарського засобу в твердій лікарській формі (у тому числі таблетках) є підтвердження його біоеквівалентності оригінальному (референтному) лікарському засобу in vivo у клінічному дослідженні за участю здорових добровольців (МОЗ України, 2005; EMA, 2010; СТ-Н МОЗУ 42-7.2:2018).

Важливим практичним результатом підтвердження біоеквівалентності генеричного лікарського засобу референтному лікарському засобу є можливість екстраполювати доведену за даними доклінічних і клінічних досліджень ефективність та безпеку референтного лікарського засобу на генеричний лікарський засіб. Відповідно, за умов доведення біоеквівалентності ефективність та безпека цих лікарських засобів по суті однакові.

Мета клінічного дослідження — довести біоеквівалентність лікарського засобу Превентор, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, по 20 мг розувастатину, виробництва ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця» (Україна), референтному лікарському засобу Крестор, таб­летки, вкриті плівковою оболонкою, по 20 мг розувастатину, виробництва «АстраЗенека ЮК Лімітед» (Велика Британія), шляхом порівняльного вивчення їх біодоступності при одноразовому прийомі натще здоровими добровольцями.

Об’єкт і методи дослідження

Клінічне дослідження з оцінки біоеквівалентності проведено відповідно до чинного законодавства України (Верховна Рада України, 1996; МОЗ України, 2005; 2009; СТ-Н МОЗУ 42-7.0:2008; СТ-Н МОЗУ 42-6.0:2008; СТ-Н МОЗУ 42-7.1:2016), міжнародних рекомендацій (OECD, 2004; WHO TRS № 937, 2006; EMA, 2010; 2015; 2016; European Commission, 2013; ICH, 2016) та етичних принципів Гельсінської декларації (Всемирная медицинская ассоциация, 1964). Спонсор дослідження — ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця».

Досліджувані лікарські засоби

Для проведення дослідження тестовий (Т) лікарський засіб Превентор, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, по 20 мг розувастатину (у вигляді розувастатину кальцію), надано компанією ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця». Превентор вироб­ляється відповідно до міжнародного стандарту Належної виробничої практики (GMP), і його зареєстровано для медичного застосування в Україні (Наказ МОЗ України від 05.07.2019 р. № 1554).

Як референтний (R) лікарський засіб у дослідженні використано Крестор, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, по 20 мг розувастатину (у вигляді розувастатину кальцію), виробництва «АстраЗенека ЮК Лімітед» (Велика Британія).

Згідно з протоколом лікарські засоби приймали одноразово натще, після щонайменше 10-годинного голодування, у разовій дозі 20 мг розувастатину (1 таблетка).

Суб’єкти дослідження

Клінічна частина дослідження проведена в ТОВ «КДЦ «Фармбіотест» (Україна). Для участі в дослідженні запросили 42 добровольці чоловічої та жіночої статі віком 18–55 років. Після надання інформованої згоди на участь у дослідженні та перевірки на відповідність критеріям включення/невключення 30 здорових добровольців продовжили участь у дослідженні. У ході випробування режим харчування та фізичної активності добровольців було стандартизовано.

Дизайн дослідження

Дизайн дослідження — порівняльне рандомізоване перехресне з чотирма періодами і двома послідовностями (за схемою TRTR/RTRT) з осліпленням аналітичного етапу клінічне дослідження. Схематично дизайн дослідження представлено на рис. 1.

Рис. 1. Дизайн дослідження з доведення біоеквівалентності лікарського засобу Превентор референтному лікарському засобу Крестор

Тут і далі: ДІ — довірчий інтервал; Т — тестовий лікарський засіб Превентор; R — референтний лікарський засіб Крестор.

Після проходження скринінгу та рандомізації у І період дослідження кожен здоровий доброволець натще одноразово прийняв 1 таблетку лікарського засобу Превентор (тестовий лікарський засіб «Т») або 1 таблетку лікарського засобу Крестор (референтний лікарський засіб «R»). Після періоду «відмивання» кожен доброволець, який у І період отримав лікарський засіб «Т», у ІІ період прийняв 1 таблетку лікарського засобу «R», а кожен доброволець, який у І період отримав лікарський засіб «R», у ІІ період — 1 таблетку лікарського засобу «Т». У ІІІ і ІV періоди кожний доброволець відповідно до протоколу отримував той самий лікарський засіб, що й у І і ІІ періоди відповідно (див. рис. 1).

Таким чином, упродовж усього дослідження сумарно за 4 періоди кожний доброволець прийняв 80 мг (4 таблетки) розувастатину. Загальна тривалість дослідження для кожного добровольця не перевищувала 61 день, включаючи скринінг, І період дослідження, період «відмивання», ІІ період дослідження, період «відмивання», ІІІ період дослідження, період «відмивання», ІV період дослідження та заключний візит.

Аналітична частина дослідження

Для того щоб оцінити фармакокінетичні параметри, у кожного здорового добровольця у рамках кожного періоду випробування відібрано 21 пробу крові впродовж 72 год.

Аналітичну частину дослідження та статистичну обробку фармакокінетичних даних проведено в біоаналітичній лабораторії ТОВ «Квінта-Аналітика» (QUINTA-ANALYTICA s.r.o., Прага, Чеська Республіка). Діяльність цієї лабораторії здійснюється згідно з вимогами Належної лабораторної практики (GLP), що підтверджує сертифікат, виданий чеським регуляторним органом (SUKL). Кількісне визначення розувастатину в плазмі крові кожного здорового добровольця проводили методом високоефективної рідинної хроматографії з тандемним мас-селективним детектуванням. При цьому нижня межа кількісного визначення розувастатину в зразках плазми крові становила 0,050 нг/мл. Метод валідовано згідно з міжнародними та українськими рекомендаціями (Жукова Н.А. и соавт., 2013; EMA, 2015).

Статистичний аналіз

У ході статистичного аналізу фармакокінетичних даних побудовано індивідуальні графіки залежності концентрації розувастатину від часу у вихідних і логарифмічно перетворених одиницях. На основі отриманих експериментальних даних визначено такі параметри фармакокінетики (ФК): максимальну концентрацію (C_max) розувастатину, час досягнення максимальної концентрації (T_max), площу під фармакокінетичною кривою з моменту прийому лікарського засобу до останньої точки, що визначається (AUC_0–t), площу під фармакокінетичною кривою з моменту прийому лікарського засобу до нескінченності (AUC_0–∞), константу швидкості елімінації (K_el) та T_½. Для показників C_max, AUC_0–t, AUC_0–∞ виконано багатофакторний дисперсійний аналіз, що ґрунтувався на змішаній моделі.

Для оцінки біоеквівалентності тестового лікарського засобу Превентор, таб­летки, вкриті плівковою оболонкою, референтному лікарському засобу Крестор, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, розраховано 90% ДІ відношення геометричних середніх значень показників C_max та AUC_0–t. Лікарські засоби вважали біоеквівалентними, якщо верхня і нижня межі зазначених ДІ знаходилися в діапазоні 80,00–125,00% (ЕМА, 2010; СТ-Н МОЗУ 42-7.2:2018).

Статистичну обробку фармакокінетичних даних виконано за допомогою програмного забезпечення «WinNonlin Professional» («Pharsight Corporation», США), «SAS^®» («SAS Institute Inc.», США) і «Microsoft Excel 2007» («Microsoft Corporation», США).

Оцінка переносимості та безпеки

Переносимість досліджуваних лікарських засобів оцінювали на основі даних, отриманих шляхом реєстрації побічних реакцій/побічних явищ (ПР/ПЯ), та результатів фізикального і лабораторно-інструментального обстежень.

Результати та їх обговорення

Дослідження розпочато після затвердження Міністерством охорони здоров’я України (наказ МОЗ України від 08.08.2018 р. № 1465) та схвалення Комісії з питань етики при ТОВ «КДЦ «Фармбіотест».

До скринінгу 42 добровольці підписали інформовану згоду на участь у дослідженні. За результатами скринінгу 30 здорових добровольців відповідали всім критеріям включення/невключення (середній вік (M±SD) — 29,30±6,65 року). Повністю завершили дослідження 29 здорових добровольців, один відмовився від участі в дослідженні під час IV періоду (після відбору 18 проб крові з 21). Розподіл добровольців у ході дослідження представлено на рис. 2.

Рис. 2. Розподіл добровольців у дослідженні з доведення біоеквівалентності лікарського засобу Превентор референтному лікарському засобу Крестор

Оцінка біоеквівалентності

До аналізу фармакокінетики включено дані 30 добровольців. За результатами визначення індивідуальних концентрацій розувастатину в плазмі крові добровольців після прийому тестового і референтного лікарському засобу у всіх чотирьох періодах дослідження отримано такі усереднені криві залежності «концентрація — час» (рис. 3).

Рис. 3. Усереднені криві залежності «концентрація — час» для генеричного лікарського засобу Превентор та референтного лікарського засобу Крестор у кожній точці забору зразків крові (n=60)

На базі індивідуальних концентрацій розувастатину в плазмі крові добровольців розраховано основні фармакокінетичні параметри та другорядні параметри, які додатково підтверджують біоеквівалентність лікарського засобу (табл. 1).

Розраховані межі 90% ДІ для відношення геометричних середніх значень C_max та AUC_0–t для лікарських засобів Превентор та Крестор становили 91,19–105,53% та 93,67–104,79% відповідно. Отже, отримані числові значення задовольняють критерій біоеквівалентності (80,00–125,00%) для AUC_0–t та C_max для розувастатину (табл. 2). Межі 90% ДІ для відношення геометричних середніх AUC_0–∞ для досліджуваних лікарських засобів (92,18–103,78%) також відповідають критерію прийнятності щодо біоеквівалентності.

n — кількість спостережень, включена в аналіз; LSM — метод найменших квадратів.

Отже, ґрунтуючись на результатах аналізу C_max та AUC_0–t розувастатину, можна зробити висновок, що генеричний лікарський засіб Превентор, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, по 20 мг розувастатину, виробництва ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця», є біоеквівалентним референтному лікарському засобу Крестор, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, по 20 мг розувастатину, виробництва «АстраЗенека ЮК Лімітед» (Велика Британія).

Аналіз переносимості та безпеки

До аналізу переносимості та безпеки включено дані всіх добровольців, які отримали хоча б одну дозу досліджуваного лікарського засобу (n=30). Після прийому здоровими добровольцями досліджуваних лікарських засобів у разовій дозі 20 мг розувастатину зареєстровано 6 випадків ПЯ у 4 добровольців: запаморочення (2 випадки), слабкість (2 випадки), біль у животі (1 випадок) та підшкірний крововилив (1 випадок). Ці ПЯ мали маловірогідний чи сумнівний зв’язок із прийомом досліджуваного лікарського засобу і розцінені як несерйозні, легкого ступеня тяжкості й не вимагали лікування.

За результатами клініко-лабораторного обстеження (загальний аналіз крові, біохімічний аналіз крові, загальний аналіз сечі), фізикального обстеження з визначенням основних вітальних показників (артеріальний тиск, частота пульсу, температура тіла) та електрокардіографії у добровольців не виявлено клінічно значущих відхилень впродовж дослідження.

Отже, аналіз результатів обстеження 30 здорових добровольців свідчить про порівнянну переносимість та безпеку після одноразового прийому лікарського засобу Превентор, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, по 20 мг розувастатину, виробництва ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця» (Україна), і Крестор, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, по 20 мг розувастатину, виробництва «АстраЗенека ЮК Лімітед» (Велика Британія).

Висновки

1. За результатами проведеного з дотриманням міжнародних стандартів клінічного дослідження за участю здорових добровольців доведено біоеквівалентність генеричного лікарського засобу Превентор, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, по 20 мг розувастатину (у вигляді розувастатину кальцію), виробництва ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця», референтному лікарському засобу Крестор, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, по 20 мг розувастатину (у вигляді розувастатину кальцію), виробництва «АстраЗенека ЮК Лімітед» (Велика Британія).

2. За даними клінічного випробування обидва лікарські засоби характеризувалися подібним профілем переносимості та безпеки за умов одноразового прийому здоровими добровольцями натще.

Спонсор дослідження ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця» висловлює подяку співробітникам ТОВ «КДЦ «Фармбіотест» (Україна) та біоаналітичній лабораторії ТОВ «Квінта-Аналітика» (Чеська Республіка) за проведення дослідження та обробку його результатів

Список використаної літератури

• Верховна Рада України (1996) Закон України від 04.04.1996 р. № 123/96-ВР «Про лікарські засоби» (https://zakon.rada.gov.ua/laws/show/123/96-%D0%B2%D1%80).
• Всемирная медицинская ассоциация (1964) Хельсинская декларация Всемирной медицинской ассоциации. Этические принципы для медицинских исследований с привлечением человека в качестве субъекта испытания (с изменениями).
• Гандзюк В.А., Дячук Д.Д., Кондратюк Н.Ю. (2017) Динаміка захворюваності та смертності внаслідок хвороб системи кровообігу в Україні (регіональний аспект). Вісн. пробл. біол. мед., 2: 319–323.
• Жукова Н.А., Либина В.В., Кудрис И.В., Падалко Н.Н. (2013) Валидация биоаналитического метода. Метод. рекоменд. ГЭЦ МЗ Украины, Киев, 35 с.
• МОЗ України (2005) Наказ від 26.08.2005 р. № 426 «Про затвердження Порядку проведення експертизи реєстраційних матеріалів на лікарські засоби, що подаються на державну реєстрацію (перереєстрацію), а також експертизи матеріалів про внесення змін до реєстраційних матеріалів протягом дії реєстраційного посвідчення» (https://zakon.rada.gov.ua/laws/show/z1069-05).
• МОЗ України (2009) Наказ від 23.09.2009 р. № 690 «Про затвердження Порядку проведення клінічних випробувань лікарських засобів та експертизи матеріалів клінічних випробувань і Типового положення про комісії з питань етики» (https://zakon.rada.gov.ua/laws/show/z1010-09).
• СТ-Н МОЗУ 42-6.0:2008 (2009) Лікарські засоби. Належна лабораторна практика: Настанова. Київ, 48 с.
• СТ-Н МОЗУ 42-7.0:2008 (2009) Лікарські засоби. Належна клінічна практика: Настанова. Київ, 48 с.
• СТ-Н МОЗУ 42-7.1:2016 (2017) Лікарські засоби. Дослідження біоеквівалентності: Настанова. Затверджено наказом МОЗ України від 12.01.2017 р. № 22.
• СТ-Н МОЗУ 42-7.2:2018 (2018) Лікарські засоби. Дослідження біоеквівалентності: Настанова. Затверджено наказом МОЗ України від 02.11.2018 р. № 2014.
• Теренда Н.О. (2015) Смертність від серцево-судинних захворювань як державна проблема. Вісн. наук. дослідж., 4: 11–13.
• EMA (2010) Guideline on the investigation of bioequivalence. CPMP/EWP/QWP/1401/98/Rev.1/Corr (https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-guideline/guideline-investigation-bioequivalence-rev1_en.pdf).
• EMA (2015) Guideline on bioanalytical method validation. EMEA/CHMP/192217/2009 Rev. 1 Corr 2 (https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-guideline/guideline-bioanalytical-method-validation_en.pdf).
• EMA (2016) Guideline for good clinical practice E6(R2). EMA/CHMP/ICH/135/199 (https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-guideline/ich-e-6-r1-guideline-good-clinical-practice-step-5_en.pdf).
• Endo A. (2010) A historical perspective on the discovery of statins. Proc. Jpn. Acad. Ser. B. Phys. Biol. Sci., 86(5): 484–493.
• European Commission (2013) Directive 2001/20/EC of the European Parliament and of the Council of 4 April 2001 on the approximation of the laws, regulations and administrative provisions of the Member States relating to the implementation of good clinical practice in the conduct of clinical trials on medicinal products for human use (http://ec.europa.eu/health/files/eudralex/vol-10/ctqa_v11.pdf, http://ec.europa.eu/health/files/clinicaltrials/2012_07/summary/2012_07_summary_en.pdf).
• Fedder D.O., Koro C.E., L’Italien G.J. (2002) New National Cholesterol Education Program III guidelines for primary prevention lipid-lowering drug therapy: projected impact on the size, sex, and age distribution of the treatment-eligible population. Circulation, 105(2): 152–156.
• Grundy S., Becker D., Luther C. (2002) Third Report of the National Cholesterol Education Program (NCEP). Detection, evaluation and treatment of high blood cholesterol in adults (Adult Treatment Panel III). Final report. Natl. Heart Lung Blood Inst., 106: 3143.
• ICH (2016) Integrated addendum to ICH E6(R1): Guideline for good clinical practice E6(R2) (https://www.ich.org/fileadmin/Public_Web_Site/ICH_Products/Guidelines/Efficacy/E6/E6_R2__Step_4_2016_1109.pdf).
• Jellinger P.S., Handelsman Y., Rosenblit P.D. et al. (2017) American Association of Clinical Endocrinologists and American College of Endocrinology guidelines for management of dyslipidemia and prevention of cardiovascular disease. Endocr. Pract., 23(Suppl. 2): 1–87.
• Lewis S.J. (2011) Lipid-lowering therapy: who can benefit? Vasc. Health Risk Manag., 7: 525–534.
• McFarland A.J., Anoopkumar-Dukie S., Arora D.S. et al. (2014) Molecular mechanisms underlying the effects of statins in the central nervous system. Int. J. Mol. Sci., 15(11): 20607–20637.
• Morris P.B., Ballantyne C.M., Birtcher K.K. et al. (2014) Review of clinical practice guidelines for the management of LDL-related risk. J. Am. Coll. Cardiol., 64(2): 196–206.
• OECD (2004) The OECD principles of good laboratory practice (GLP).
• Pappa E., Rizos C.V., Filippatos T.D., Elisaf M.S. (2019) Emerging fixed-dose combination treatments for hyperlipidemia. J. Cardiovasc. Pharmacol. Ther., 24(4): 315–322.
• Reiner Z., Catapano A.L., De Backer G. et al. (2011) ESC/EAS guidelines for the management of dyslipidaemias: the task force for the management of dyslipidaemias of the European Society of Cardiology (ESC) and the European Atherosclerosis Society (EAS). Eur. Heart J., 32(14): 1769–1818.
• Roger V.L., Go A.S., Lloyd-Jones D.M. et al. (2011) Heart disease and stroke statistics–2011 update: a report from the American Heart Association. Circulation, 123(4): e18–e209.
• WHO TRS № 937 (2006) Additional guidance for organization performing in vivo bioequivalence studies. Annex 9.
• Wood D., De Backer G., Faergeman O. et al. (1998) Prevention of coronary heart disease in clinical practice: recommendations of the Second Joint Task Force of European and other Societies on Coronary Prevention. Atherosclerosis, 140: 199–270.

Адреса для листування:
Андрій Михайлович Дорошенко
02093, Київ, вул. Бориспільська, 13
ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця»
E-mail: [email protected]

Одержано 05.08.2019